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申请/专利权人：上海市计量测试技术研究院

摘要：本发明提供了检测多粘菌素耐药基因的数字PCR引物探针组合物、试剂盒及方法。所述数字PCR引物探针组合物包括分别检测MCR‑6基因、MCR‑7基因、MCR‑8基因、MCR‑9基因和MCR‑10基因的引物对和探针。所述数字PCR引物探针组合物具备高灵敏度和特异性，能够有效应用于数字PCR中，对MCR家族基因进行快速、灵敏、准确检测，利用所述数字PCR引物探针组合物制备的数字PCR试剂盒可以对样本是否含有MCR家族基因以及具体的基因种类进行快速准确的检测，并且可以对基因的拷贝数进行检测，实现了基因的绝对定量；无需建立标准曲线，实验的重复性、平行性及灵敏性均较好。

主权项：1.检测多粘菌素耐药基因的数字PCR引物探针组合物，其特征在于，所述数字PCR引物探针组合物为分别检测MCR-6基因、MCR-7基因、MCR-8基因、MCR-9基因和MCR-10基因的引物对和探针；其中，所述MCR-6基因的引物对为SEQIDNo.1~2所示的核苷酸序列，所述MCR-6基因的探针为SEQIDNo.3所示的核苷酸序列；所述MCR-7基因的引物对为SEQIDNo.4~5所示的核苷酸序列，所述MCR-7基因的探针为SEQIDNo.6所示的核苷酸序列；所述MCR-8基因的引物对为SEQIDNo.7~8所示的核苷酸序列，所述MCR-8基因的探针为SEQIDNo.9所示的核苷酸序列；所述MCR-9基因的引物对为SEQIDNo.10~11所示的核苷酸序列，所述MCR-9基因的探针为SEQIDNo.12所示的核苷酸序列；所述MCR-10基因的引物对为SEQIDNo.13~14所示的核苷酸序列，所述MCR-10基因的探针为SEQIDNo.15所示的核苷酸序列；所述MCR-6基因的引物对的终浓度为380~420nM，所述MCR-6基因的探针的终浓度为80~120nM；所述MCR-7基因的引物对的终浓度为380~420nM，所述MCR-7基因的探针的终浓度为80~120nM；所述MCR-8基因的引物对的终浓度为380~420nM，所述MCR-8基因的探针的终浓度为80~120nM；所述MCR-9基因的引物对的终浓度为380~420nM，所述MCR-9基因的探针的终浓度为80~120nM；所述MCR-10基因的引物对的终浓度为380~420nM，所述MCR-10基因的探针的终浓度为180~220nM。

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