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一种血浆游离DNA的提取方法 

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申请/专利权人:江苏一米生物科技有限公司

摘要:本发明涉及生物样本提取技术领域,且公开了一种血浆游离DNA的提取方法,稀土Y3+在4f轨道上有未耦合的电子,呈现顺磁性,改性磁性纳米微球的饱和磁化强度较高,能够在极小的磁场作用下实现快速分离的效果;通过在壳聚糖表面引入席夫碱和季铵盐结构,实现对磁性纳米粒子的缠绕包覆连接,席夫碱通过π‑π堆积作用与DNA分子相互结合,从而实现控制DNA吸附;阳离子季铵盐壳聚糖可以和带有阴离子的DNA有效地结合,通过静电作用将DNA固定在磁性微球表面,实现分离纯化的目的;本发明提供的游离DNA的提取方法,可以防止自由基对游离DNA结构的破坏,保证游离DNA的结构完整性,工艺简单,适合大规模推广和应用。

主权项:1.一种血浆游离DNA的提取方法,其特征在于,所述提取方法包括以下步骤:取5支1.5mL的离心管,加入250μL的DNA标准溶液和150μL缩合液,在室温下培育5-15min,接着加入50-250μg的改性磁性纳米微球分散于缓冲液中,在室温下培育10-25min,利用外置磁铁将磁性微球沉淀下来,上清液分别移至另外5支离心管中,制成血浆稀释液用于游离DNA的提取;其中DNA标准溶液的配制方法为:称取1.21g三羟甲基氨基甲烷和0.37g乙二胺四乙酸溶于去离子水中,用1M的盐酸溶液调节pH至4,得到缓冲液;接着称取10mg的小牛胸腺DNA溶于10mL缓冲液中,得到1mgmL的DNA标准溶液。

全文数据:

权利要求:

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