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申请/专利权人:中国农业科学院作物科学研究所;盐碱地综合利用技术创新中心
摘要:本发明提供了一种提高大豆产量与耐盐能力的方法,包括如下步骤:根据gma‑MIR396j基因组序列设计gDNA,构建基因编辑载体,将基因编辑载体转化到农杆菌EHA105中,获得侵染液;将用氯气灭菌后的大豆种子在发芽培养基中过夜萌发,将子叶对半切开,胚根保留2‑3mm,胚芽处划5‑7刀,放入所述侵染液侵染30min;培养直至不再有伸长的幼芽;在芽伸长培养基中将伸长至3‑5mm的所有幼芽剪下,转移至生根培养基中培养至根系发达,利用QuickStixPATbar试剂盒以及测序分析筛选出gma‑MIR396j基因编辑大豆。发明得到耐盐高产的大豆新材料,获得了gma‑MIR396j基因编辑大豆,不仅能够提高大豆的产量,还能够提高大豆在苗期、开花期和全生育期的耐盐能力,提高大豆对盐碱地的适应性。
主权项:1.一种提高大豆产量与耐盐能力的方法,其特征在于,包括如下步骤:将gma-MIR396j基因编辑载体转化到农杆菌EHA105中,获得侵染液;将用氯气灭菌后的大豆种子在发芽培养基中过夜萌发,将子叶对半切开,胚根保留2-3mm,胚芽处划5-7刀,放入所述侵染液侵染30min;用无菌滤纸吸干子叶上残留的侵染液,使子叶平面面朝培养基置入盖上滤纸的培养基中,进行共培养;共培养4d后,去除子叶节伸长的下胚轴,保留2-3mm,使用洗涤培养基脱菌后,平面向上,胚根朝下,45°斜插入恢复培养基中,恢复培养7d;将子叶转移入芽诱导培养基诱导培养14d,更换芽诱导培养基,再次培养14d,获得生长芽;将所述生长芽转移入芽伸长培养基中芽伸长培养,每14d更换一次芽伸长培养基,直至不再有伸长的幼芽;在芽伸长培养基中将伸长至3-5mm的所述幼芽剪下,转移至生根培养基中培养至根系发达,利用QuickStixPATbar试剂盒以及测序分析筛选出gma-MIR396j基因编辑大豆;其中,所述gma-MIR396j基因编辑载体导致大豆植株在苗期、开花期和全生育期的耐盐能力及大豆植株单株荚数、单株籽粒重的提高。
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