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申请/专利权人：瑞吉明(山东)生物科技有限公司
摘要：本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种多聚核苷酸的制备方法及其在细胞修复中的应用，所述多聚核苷酸的制备方法，包括以下步骤：采用CPG载体和核苷酸单体构建序列，洗脱纯化得PN序列；选用聚乳酸‑羟基乙酸共聚物制备纳米载体；调整缓冲液，静电吸附结合超声辅助，使纳米载体装载PN序列，得多聚核苷酸生物活性载体。本发明使用特定多聚核苷酸序列，并在序列两端2'‑O‑甲基化修饰，提高序列的稳定性和生物活性，使用纳米载体保护PN免受体内酶解，提高多聚核苷酸的生物相容性，利用叶酸受体过表达和PN序列靶向激活p53信号通路，提升递送效率，显著增强受损细胞的DNA修复效率。
主权项：1.一种多聚核苷酸（PN）生物活性载体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）PN序列制备：采用CPG载体与固相合成技术，C端到N端逐步添加保护的核苷酸单体，确保每个步骤后偶联效率，通过酸性条件脱保护并封端，直至完成序列构建；合成完成后洗脱PN序列并脱除所有保护基团，使用反相HPLC纯化，确保纯度≥95%，得到PN序列；所述多聚核苷酸序列如SEQIDNO:1所示，其中的m表明C碱基进行了2'-O-甲基化修饰；对PN序列两端进行生物素标记；（2）纳米载体构建：选用聚乳酸-羟基乙酸共聚物PLGA制备粒径为100-200nm的纳米颗粒；表面涂覆聚组氨酸和聚乙二醇PEG的共聚物，并通过点击化学反应连接叶酸分子至PEG链末端，得纳米载体，通过化学偶联反应在纳米载体表面接枝生物素分子；（3）PN序列装载与偶联：通过调整缓冲液条件以匹配纳米载体与PN序列电荷，采用静电吸附法结合超声波辅助，在35-38℃装载PN序列；利用链霉亲和素连接生物素标记的PN序列与纳米载体上的生物素，得到多聚核苷酸生物活性载体。
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百度查询： 瑞吉明(山东)生物科技有限公司 一种多聚核苷酸的制备方法及其在细胞修复中的应用
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