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申请/专利权人：北京智飞绿竹生物制药有限公司;重庆智飞生物制品股份有限公司;安徽智飞龙科马生物制药有限公司
摘要：本发明的目的提供一种规模化制备类志贺邻单胞菌特异性多糖的方法，类志贺邻单胞菌是一种革兰氏阴性杆菌，可引起急性腹泻和食物中毒，其O抗原与多种痢疾血清型存在交叉反应。特异性多糖也称O‑特异性多糖是O抗原的一个组成部分，本发明以类志贺邻单胞菌菌体为原料，通过发酵培养、水解、纯化等步骤制备特异性多糖，制备出的特异性多糖可以作为原材料或终产品用于疾病诊断、预防、治疗等，也可制备特异性多糖的标准品或参比品，也可以用于制备偶联疫苗。
主权项：1.一种规模化制备类志贺邻单胞菌特异性多糖的方法，其特征在于，以类志贺邻单胞菌为原料，经发酵培养、水解、纯化步骤获得特异性多糖，其中，所述水解，包括以下步骤：1取菌体加入溶剂中，制成5％～10％浓度的菌悬液，2调节菌悬液pH值至2～4，3加热至90～100℃，持续搅拌下反应60～200分钟，4将反应液置于冰水浴中，加入沉淀剂，沉淀剂为胆酸或胆酸盐及其衍生物，添加浓度为0.1％～2％，5静置1～3小时，离心或过滤后收集水解液；其中，所述纯化，包括以下步骤：1调节水解上清液pH值至中性，2使用超滤膜包将水解液上清超滤浓缩，收集截留组份，3使用0.01molL磷酸盐缓冲溶液，将截留组份透析洗涤，收集透析液，4使用离子交换类层析介质，将透析液层析分离，收集206nm处流穿组份，5使用超滤膜包将流穿组份超滤浓缩，注射用水置换样品中盐分，收集多糖溶液，6将多糖溶液置于-30℃以下冷冻2～6小时后冻干，即为特异性多糖。
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