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申请/专利权人：首都医科大学附属北京胸科医院;北京市结核病胸部肿瘤研究所

摘要：本发明公开了细胞因子作为标记物在制备肺外结核诊断或治疗预后产品中的应用，涉及传染病检测技术领域。细胞因子IP‑10、IL‑2Rα和MCP‑1可用于诊断是否感染结核分枝杆菌，用于诊断肺外结核病，可用于制备治疗预后产品。IP‑10、MCP‑1、IL‑10和IL‑6还可用于区分MTB和NTM感染，具有菌种特异性，可用于制备病原菌类型鉴定产品。

主权项：1.细胞因子作为标记物在制备病原菌类型鉴定产品中的应用，其特征在于，所述细胞因子为MCP-1，所述病原菌类型鉴定产品用于区分样本属于结核分枝杆菌感染和非结核分枝杆菌感染；所述鉴定产品选自试剂、试剂盒和芯片；所述非结核分枝杆菌选自堪萨斯分枝杆菌和或脓肿分枝杆菌；其中，病原菌类型的鉴定方法包括如下步骤：（1）诱导THP-1为巨噬细胞：将THP-1细胞，用完全培养基培养，将细胞浓度调整为5×105cellsmL，所述完全培养基是加入10%FBS的1640培养基，加入终浓度为10μgmL的PMA诱导24小时；将含PMA的细胞悬液加至培养板上，细胞量为1×106，每孔为2mL；铺匀培养板中细胞，置于细胞培养箱中，37℃孵育24小时；（2）结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌感染巨噬细胞：感染前先吸去未贴壁细胞的上清，用1640培养基后清洗去除PMA，再加入完全培养液2mL，置于细胞培养箱；取出接种于中性罗氏培养基的MTB标准菌株H37Rv和NTM标准株，刮取菌落至瓶中，加入完全培养基重悬并稀释，使每种菌液最终OD600为0.6；按照MOI=1，即细菌数目：细胞数=1：1，将上述菌液用完全培养基进行稀释，使每种菌液终浓度为5×105CFUmL；取出已贴壁巨噬细胞的培养板，吸去每孔中的上清后，将终浓度为5×105CFUmL的所述菌液加入六孔培养板中，每孔2mL；将六孔培养板置于细胞培养箱孵育，计时为感染时间；在感染2小时，取出感染后的细胞，吸去每孔中的上清，加入1640培养基后，再吸去上清，清洗胞外菌，再加入完全培养液2mL，置于细胞培养箱孵育；（3）收集感染模型的细胞上清，采用液相芯片技术检测细胞因子MCP-1的水平。

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权利要求：

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