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申请/专利权人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
摘要：本发明公开了一种用于检测宿主同源重组修复能力的报告系统及其构建方法。本发明提供了报告载体，其上含有DNA片段A自5’端到3’端依次含有启动子、改造后荧光素酶编码基因和终止序列；所述改造后荧光素酶编码基因为：在正常荧光素酶编码基因中选取200bp片段记为片段B，以正常荧光素酶编码基因上片段B末位核苷酸和其下游相邻的核苷酸之间的位置作为插入位点，正向插入由CRISPRCas9靶序列和片段B顺次连接组成的片段后即得。本发明以荧光素酶基因为报告基因，基于同源重组原理构建了报告载体，以及靶向剪切同源臂间序列的CRISPRCas9系统，可根据荧光素化学发光反映宿主同源重组修复能力强弱。
主权项：1.报告载体，其特征在于：所述报告载体上含有DNA片段A；所述DNA片段A自5’端到3’端依次含有启动子、由所述启动子启动转录的改造后荧光素酶编码基因，以及终止转录的终止序列；所述改造后荧光素酶编码基因为在正常荧光素酶编码基因的基础上进行如下改造后所得：在所述正常荧光素酶编码基因的序列中选取一段200bp的片段，记为片段B，然后以所述正常荧光素酶编码基因中所述片段B所在的3’端最后一个核苷酸和其下游相邻的核苷酸之间的位置作为插入位点，正向插入片段C，即得所述改造后荧光素酶编码基因；所述片段C自5’端到3’端依次由CRISPRCas9靶序列和所述片段B组成。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 一种用于检测宿主同源重组修复能力的报告系统及其构建方法
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