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申请/专利权人：北京三元食品股份有限公司;内蒙古大学
摘要：本发明公开了一种牛乳源的干细胞及其分离培养方法。其中的分离培养方法包括以下步骤（1）取新鲜牛乳，分离获得牛乳中的细胞；（2）将培养皿提前用基质胶包被，后弃液，然后用清洗液清洗，弃液；（3）将步骤（1）处理的细胞接种于包被好的培养皿上，用干细胞培养基培养；（4）当细胞融合至80%以上时，用消化酶消化，终止消化，分离细胞，用CTFR培养液重悬后接种于饲养层细胞上培养，促进克隆形成，传代培养获得牛乳干细胞。本发明首次从牛乳中分离、培养得到干细胞，可以更好的维持牛乳干细胞未分化状态，得到的干细胞具有OCT4、SOX2、NANOG、SSEA4标志物。为进行牛细胞诱导分化提供一种新的干细胞类型。
主权项：1.一种牛乳源的干细胞的分离培养方法，其特征在于，所述干细胞从牛乳中经分离、培养传代得到，所述干细胞的表达标志物为OCT4、SOX2、NANOG、SSEA4，分离培养方法按照如下步骤进行：（1）取新鲜牛乳，分离获得牛乳中的细胞；取新鲜牛乳时对乳牛乳房表面进行消毒；（2）将培养皿提前用干细胞贴壁培养基质胶包被，后弃液，然后用清洗液清洗，弃液；其中，所述干细胞贴壁培养基质胶为VitronectinXF；（3）将步骤（1）处理的细胞接种于包被好的培养皿上，用干细胞培养基培养；所述干细胞培养基为mTeSRPlus；（4）待细胞融合至80%以上时，用消化酶消化，终止消化，分离细胞，用干细胞培养液重悬后接种于饲养层细胞上培养，促进克隆形成，传代培养6-10代获得牛乳干细胞；其中所述干细胞培养液为CTFR培养液，干细胞培养液每天换液；饲养层细胞为小鼠胎儿成纤维细胞。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 北京三元食品股份有限公司 内蒙古大学 一种牛乳源的干细胞及其分离培养方法
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