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申请/专利权人：广东省大湾区华南理工大学聚集诱导发光高等研究院;广州艾格科技发展有限公司

摘要：本发明公开了一种检测超敏心肌肌钙蛋白T的免疫层析试纸条及其制备方法和应用。所述试纸条包括底板和在底板上依次搭接的样品垫、结合垫、分析膜和吸水垫；所述结合垫上包被有生物素标记的超敏心肌肌钙蛋白T第一抗体和聚集诱导发光微球标记的超敏心肌肌钙蛋白T第二抗体；所述超敏心肌肌钙蛋白T第一抗体和超敏心肌肌钙蛋白T第二抗体识别的抗原表位不同；所述分析膜上设置有检测线和质控线，所述检测线上包被有链霉亲和素。本发明采用AIE荧光微球、生物素链霉素系统以及“混合标记”工艺显著提升灵敏度以及消除各种非特异性荧光的干扰，提高准确度，且显著扩宽线性范围。

主权项：1.检测超敏心肌肌钙蛋白T的免疫层析试纸条，其特征在于，所述试纸条包括底板和在底板上依次搭接的样品垫、结合垫、分析膜和吸水垫；所述结合垫上包被有生物素标记的超敏心肌肌钙蛋白T第一单克隆抗体和聚集诱导发光微球同时标记超敏心肌肌钙蛋白T第二单克隆抗体和质控物的复合荧光标记物；所述超敏心肌肌钙蛋白T第一单克隆抗体和超敏心肌肌钙蛋白T第二单克隆抗体识别的抗原表位不同；所述分析膜为硝酸纤维素膜，其上设置有检测线和质控线，所述检测线上包被有链霉亲和素；所述聚集诱导发光微球的粒径为200nm~300nm；所述质控线上包被有质控物的结合物；所述质控物为羊抗鸡IgY抗体，质控物的结合物为鸡IgY抗体；所述结合垫的制备包括：用微球稀释液将聚集诱导发光微球标记的超敏心肌肌钙蛋白T第二单克隆抗体和羊抗鸡IgY抗体以及生物素标记超敏心肌肌钙蛋白T第一单克隆抗体溶液均稀释至5%含量后按1:1混合后均匀喷涂两条线在结合垫上，用量为2μL液量cm结合垫；所述微球稀释液为含1%BSA、20%海藻糖、0.5%甘氨酸的20mMTris-HCl缓冲液；所述生物素包括N-羟基琥珀酰亚胺-生物素；所述检测线上链霉亲和素的包被浓度为1mgmL、用量为1μLcm；所述质控线上鸡IgY抗体的包被浓度为1mgmL、用量为1μLcm；所述样品垫包被有样品垫处理液，所述样品垫处理液为含有0.02mgmLRBC抗体、0.3mgmL异嗜性抗体阻断剂、0.5%Tween-20、0.1%BSA、2%蔗糖的10mMpH7.4的PBS溶液；所述样品垫为玻璃纤维素膜；所述聚集诱导发光微球同时标记超敏心肌肌钙蛋白T第二单克隆抗体和质控物的复合荧光标记物的制备方法包括：将超敏心肌肌钙蛋白T第二单克隆抗体和质控物混合，利用聚集诱导发光微球对混合物进行标记，所述超敏心肌肌钙蛋白T第二单克隆抗体和质控物的质量比为2:1。

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