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申请/专利权人：上海市农业科学院
摘要：本发明提供一种同时检测4b和12a血清型单增李斯特氏菌的方法，包括以下步骤：S1：DNA提取；S2：mRPA扩增：针对如SEQIDNO.1‑2所示的4b和12a血清型单增李斯特氏菌hly基因的特异性序列分别设计RPA引物，通过mRPA反应实现靶标DNA的扩增；S3：CRISPRCas12a体系鉴定，扩增的靶标DNA被crRNA识别，并与Cas12a结合形成三元复合物；S4：多色免疫层析试纸条检测信号输出，实现4b和12a血清型单增李斯特氏菌的同时检测。本发明建立了一种快速、高效和便携的快速双靶标分子核酸的检测方法，为食源性致病菌的现场检测提供良好的平台，为食品安全提供了良好保障。
主权项：1.一种同时检测4b和12a血清型单增李斯特氏菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：DNA提取；S2：mRPA扩增：针对如SEQIDNO.1所示的4b血清型单增李斯特氏菌hly基因的特异性序列和如SEQIDNO.2所示的12a血清型单增李斯特氏菌hly基因的特异性序列分别设计RPA引物，通过mRPA反应实现靶标DNA的扩增；S3：CRISPRCas12a体系鉴定：针对所述4b和12a血清型单增李斯特氏菌hly基因的特异性序列分别设计crRNA，在样品中存在靶标DNA的情况下，扩增的靶标DNA被crRNA识别，并与Cas12a结合形成三元复合物；S4：多色免疫层析试纸条检测信号输出：提供一种多色免疫层析试纸条，其采用两种信号探针，所述三元复合物开启非特异性切割，信号探针被切割，进而在多色免疫层析试纸条上输出检测信号，实现4b和12a血清型单增李斯特氏菌的同时检测。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 上海市农业科学院 一种同时检测4b和1/2a血清型单增李斯特氏菌的方法及其应用
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