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申请/专利权人：广州医科大学
摘要：本发明提供了一种在单核苷酸精度水平上检测低丰度ac4CRNA的测序技术。本发明使用优化的ac4C‑seq方法，可以以50ng的RNA起始量进行NaCNBH3化学反应。进一步地，该方法可以联合NH2OH去乙酰化处理作为阴性对照，可以大大降低假阳性的效果。更进一步地，发明人利用ac4C抗体富集ac4C修饰的RNA，再进行NaCNBH3化学反应，建库和测序。通过两种方法结合，本发明实现了以低起始量、高分辨率、高效率和高通量的优点检测到更多低丰度ac4C修饰的RNA。
主权项：1.一种在单核苷酸精度水平上检测低丰度ac4CRNA的测序技术，其特征在于：包括如下步骤：S1、提取RNA，利用ac4C抗体富集N4-乙酰胞苷修饰的RNA，得到RNA样本；S2、将步骤S1所得RNA样本进行NaCNBH3处理及建库，得到cDNA库；S3、将步骤S2所得cDNA库进行测序；步骤S3的具体步骤为：运用测序方法对步骤S2所得cDNA库进行测序，基于参考基因组数据，得出CT突变的位点，待测组与阴性对照组进行对比，最终鉴定出待测样本中发生ac4C修饰的位点，以及计算待测样本中RNA的N4-乙酰胞苷修饰程度。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 广州医科大学 一种在单核苷酸精度水平上检测低丰度ac4C RNA的测序技术
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