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利用CRISPR/Cas9系统敲除Jurkat CRBN基因的方法 

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申请/专利权人:山东第一医科大学(山东省医学科学院)

摘要:本发明涉及生物技术领域,提供一种利用CRISPRCas9系统敲除JurkatCRBN基因的方法,包括一种特异性靶向JurkatCRBN基因的CRISPRCas9基因敲除载体、CRISPRCas9基因敲除载体在JurkatCRBN基因敲除中的应用、特异性靶向JurkatCRBN基因的sgRNA、制备JurkatCRBN基因敲除细胞的方法、构建CRISPRCas9基因敲除载体的方法。本发明在使用时,利用CRISPRCas9敲除系统进行JurkatCRBN基因的敲除,以电穿孔转染方式CRISPRCas9基因敲除载体导入细胞,敲除JurkatCRBN基因。通过JurkatCRBN基因靶位点的特异选择以及针对该靶位点的sgRNA的特异设计,获得了可高效打靶JurkatCRBN基因的sgRNA,显著提高了CRISPRCas9敲除载体的打靶效率,进而显著提高了JurkatCRBN基因的敲除效率。

主权项:1.一种特异性靶向JurkatCRBN基因的CRISPRCas9基因敲除载体,其特征在于,所述载体为连接有特异性靶向JurkatCRBN基因的Lenti-CRISPRV2载体,sgRNA靶向JurkatCRBN基因的第22位至第41位的序列,其编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 山东第一医科大学(山东省医学科学院) 利用CRISPR/Cas9系统敲除Jurkat CRBN基因的方法

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