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申请/专利权人：天津农学院
摘要：本发明涉及植物组织培养与植物育种技术领域，尤其是一种半夏松散型胚性愈伤组织高效培养方法及其应用。主要利用植物天然提取液与化学激素组合搭配并且调节愈伤组织生长环境的渗透压达到培养效果，培养全程在固体培养基中进行，本申请建立一套高效的半夏松散型胚性愈伤组织诱导体系，为半夏体细胞离体诱变育种、组织脱毒及组培快繁奠定基础，通过本方法最终半夏松散型胚性愈伤组织可以保持6个月以上，解决了半夏无法在固体培养基中大量培养松散型胚性愈伤组织的问题，可以用于各种科研应用。
主权项：1.一种半夏松散型胚性愈伤组织高效培养方法，其特征在于：包括如下步骤：S1、获得半夏无菌苗：选取颗粒饱满的半夏种球，剥去种球外皮，使用70％乙醇溶液润湿半夏种球的表面，随后将润湿的种子分别置于2％-5％体积分数的次氯酸钠溶液中，分别消毒处理8-20分钟，使用无菌水进行3次每次1分钟的冲洗，以去除残留的溶液；将处理后的种子接种在含有MS培养基的广口组培瓶中，将组培瓶置于恒温培养箱中，培养14d后获得半夏无菌苗；S2、不同外植体诱导半夏的初步愈伤组织：以半夏的叶片、叶柄、珠芽、块茎作为外植体，在MS+2.0mgL2,4-D+40mlL椰子提取液+30gL蔗糖的培养基上诱导，置于恒温培养箱中，经过20天的诱导，成功产生愈伤组织；S3、诱导半夏的松散型愈伤组织：将步骤S2诱导出的半夏愈伤组织转移至培养基类型为：12MS+0.5-1.0mgL6-BA+1.5-2.0mgL2,4-D+0.5-1.0mgLNAA+40mlL椰子提取液+100mg五倍子提取液+30gL蔗糖的培养基中，置于恒温培养箱中，每两周进行一次继代培养，经过多次继代培养后，成功产生了质地松散、硬度偏软的半夏松散型愈伤组织；S4、诱导半夏的松散型胚性愈伤组织：将步骤S3中的松散型愈伤组织转移到培养基类型为：MS+1.0mgL6-BA+0.5mgL2,4-D+70mlL椰子提取液+150mgL五倍子提取液+40gL蔗糖的培养基中，两次继代后成功诱导出结构松散、质地偏硬的半夏的松散型胚性愈伤组织。
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权利要求：
百度查询： 天津农学院 一种半夏松散型胚性愈伤组织高效培养方法及其应用
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