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申请/专利权人：河南科技大学
摘要：发根农杆菌介导非组培依赖的芍药根系遗传转化种植方法，包括芍药外植体制备的步骤、侵染物制备的步骤、侵染及共培养的步骤、新生根系诱导培养的步骤、转基因根检测的步骤和复合型转基因芍药株系获得的步骤，本发明的遗传转化种植方法，以芍药的肉质根作为外植体，通过制备液体侵染物和固体侵染物，以及独特的侵染及共培养等步骤，突破了芍药转化难的技术障碍，获得了稳定转化的芍药转基因根系，为后续芍药育种资源和功能基因组学的研究奠定了基础。
主权项：1.发根农杆菌介导非组培依赖的芍药根系遗传转化种植方法，包括芍药外植体制备的步骤、侵染物制备的步骤、侵染及共培养的步骤、新生根系诱导培养的步骤、转基因根检测的步骤和复合型转基因芍药株系获得的步骤，其特征在于：在芍药外植体制备的步骤中，选用4-5年生芍药作为受体材料植株，并切取其肉质根作为芍药外植体；在侵染物制备的步骤中，选用携带有标记基因的发根农杆菌，扩繁培养至菌液浓度为OD600=0.6-1.0，并将该菌液平覆在LB固体培养基上，倒置培养至培养基表面覆盖一层均匀的发根农杆菌，作为固体侵染物；再选用携带有标记基因的发根农杆菌，采用重悬液重悬培养至浓度为OD600=0.6-1.0，作为液体侵染物；在侵染及共培养的步骤中，先使用固体侵染物对芍药肉质根的底端进行侵染处理，再利用真空泵进行辅助侵染负压处理，之后种植于基质中，浇注液体侵染物进行共培养。
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百度查询： 河南科技大学 发根农杆菌介导非组培依赖的芍药根系遗传转化种植方法
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