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提高遗传转化效率的Cas9启动子、基因编辑载体、构建方法及应用 

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申请/专利权人:西北农林科技大学;洛阳市农发农业科技有限公司

摘要:本发明公开了一种提高遗传转化效率的Cas9基因启动子、编辑载体、构建方法和应用,属于基因编辑领域,针对CRISPRCas9载体的T‑DNA插入片段表达活性进行优化,降低了转基因沉默的概率,提高了西瓜中的遗传转化效率和基因编辑效率。所述编辑载体在pBSE402的基础上,对Cas9基因进行西瓜密码子优化后,以西瓜内源泛素基因的启动子去驱动Cas9基因的表达,行成新型CRISPRCas9基因编辑载体pBUE702C,将西瓜的遗传转化效率从1.20%提高到10.41%,同时基因编辑效率也从53.88%提高到68.11%,该载体在提高了遗传转化效率的同时,还增加了基因编辑效率,对未来加快西瓜的基因功能研究和分子育种技术具有重要意义。

主权项:1.一种提高遗传转化效率的Cas9启动子,其特征在于,所述启动子为:ClRPS5A启动子或ClUBI启动子,所述ClUBI启动子的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示,所述ClRPS5A启动子的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。

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