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一种用于组织切片中游离半胱氨酸(Cys)的衍生质谱成像方法 

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申请/专利权人:安徽省疾病预防控制中心(省健康教育所省公共卫生研究院)

摘要:本发明公开一种用于组织切片中游离半胱氨酸Cys的衍生质谱成像方法,包括:步骤1对待测组织学样品进行冷冻切片处理,得到多个组织学切片;步骤2将步骤1中所得的组织学切片立即通过超音速喷雾装置喷涂衍生试剂2‑2‑氰基苯并噻唑‑6‑胺基‑N,N,N‑三甲基‑2‑乙酰‑1‑氯化铵;步骤3将步骤2的组织学切片放在甲醇的雾室中进行有效衍生反应;步骤4将步骤3的组织学切片使用三氯甲烷清洗;步骤5将步骤4的组织学切片进行解吸电喷雾质谱成像DESI‑MSI实验,并采集得到对应的MSI数据。本发明的方法原位衍生化,可以在生理条件下有效地在组织切片中原位衍生;通过衍生反应增强的检测性能显著提高Cys的质谱分析性能;实现Cys的准确检测;不干扰其他非衍生代谢产物的检测。

主权项:1.一种用于组织切片中游离半胱氨酸的衍生质谱成像方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1、对待测组织学样品进行冷冻切片处理,得到多个连续组织学切片;步骤2、将步骤1中所得的组织学切片立即通过超音速喷雾装置喷涂衍生试剂2-2-氰基苯并噻唑-6-胺基-N,N,N-三甲基-2-乙酰-1-氯化铵;步骤3、在容器中倒入甲醇液体,维持容器中的甲醇液体温度为10~50℃,容器中维持甲醇的饱和蒸汽环境;将步骤2获得的组织学切片放在充满甲醇饱和蒸汽的雾室中放置5~30min,使得衍生试剂与组织切片中的游离半胱氨酸进行有效衍生反应;步骤4、将步骤3的组织学切片使用三氯甲烷清洗;步骤5、将步骤4的组织学切片进行解吸电喷雾质谱成像实验,并采集得到对应的质谱成像数据。

全文数据:

权利要求:

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