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一种胎盘生长因子荧光免疫层析试剂卡及其应用 

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申请/专利权人:广东省大湾区华南理工大学聚集诱导发光高等研究院;广州艾格科技发展有限公司

摘要:本发明提供了一种胎盘生长因子荧光免疫层析试剂卡及其应用,包括衬底和衬底上依次设置的样品垫、结合垫、缓冲垫、硝酸纤维素膜和吸水纸;结合垫上含有生物素标记的PLGF抗体1#、AIE荧光微球同时标记的PLGF抗体2#和二硝基苯酚牛血清白蛋白偶联物;PLGF抗体1#和PLGF抗体2#识别PLGF抗原的不同表位;硝酸纤维素膜上含有包被链霉亲和素的检测线和包被有二硝基苯酚多克隆抗体的质控线。所述试剂卡稳定性好,能够准确定量检测人血清、血浆和全血样本中PLGF含量,具有检测范围宽、灵敏度高、精密度好、检测快速简便等特点。

主权项:1.一种胎盘生长因子荧光免疫层析试剂卡,其特征在于,所述试剂卡包括衬底和衬底上依次设置的样品垫、结合垫、缓冲垫、硝酸纤维素膜和吸水纸;所述结合垫上含有生物素标记的PLGF抗体1#、AIE荧光微球同时标记的PLGF抗体2#和二硝基苯酚牛血清白蛋白偶联物;所述PLGF抗体1#和PLGF抗体2#识别PLGF抗原的不同表位;所述硝酸纤维素膜上含有包被链霉亲和素的检测线和包被有二硝基苯酚多克隆抗体的质控线;所述样品垫的制备包括:用样品垫处理液处理玻璃纤维膜,用量为0.78mL样品垫处理液cm2;所述样品垫处理液为含0.001mgmL抗红细胞抗体、0.5mgmL异嗜性抗体阻断剂、0.5%吐温20、1.0%BSA、1.5%蔗糖的0.01M、pH7.4的PBS;处理后的样品垫上所述抗红细胞抗体的含量为0.78μgcm2;所述异嗜性抗体阻断剂的含量为390μgcm2;所述结合垫的制备包括:将生物素标记的PLGF抗体1#、AIE荧光微球同时标记的PLGF抗体2#和二硝基苯酚牛血清白蛋白偶联物用微球稀释液分别稀释并混合;所述微球稀释液为含0.5%甘氨酸、5%酪蛋白钠盐、4%吐温20、20%海藻糖的50mMpH7.5Tris-HCl缓冲液;稀释后的混合液中,生物素标记的PLGF抗体1#的浓度为0.05mgmL,AIE荧光微球的浓度为0.3mgmL;用稀释后的混合液均匀喷涂两条线,喷涂线上混合液的用量为3μLcm;所述结合垫上AIE荧光微球的含量为1.8μgcm;所述AIE荧光微球与PLGF抗体2#的质量比为20:1;所述AIE荧光微球与二硝基苯酚牛血清白蛋白偶联物的质量比为200:1;所述AIE荧光微球的粒径为200nm;所述缓冲垫的制备包括:采用含有吐温20、BSA、海藻糖和Tris的缓冲垫处理液处理缓冲垫,处理后的缓冲垫上所述吐温20的含量为2μgcm2;所述BSA的含量为15μgcm2;所述海藻糖的含量为15μgcm2;所述Tris的含量为20ngcm2;所述检测线上链霉亲和素的含量为0.1μgcm;所述质控线上二硝基苯酚多克隆抗体的含量为0.5μgcm。

全文数据:

权利要求:

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