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圆斑星鲽性别鉴定方法 

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申请/专利权人:中国水产科学研究院黄海水产研究所

摘要:本发明属于鱼类遗传性别鉴定技术领域,具体涉及圆斑星鲽性别鉴定方法。本发明利用基因组重测序技术从圆斑星鲽基因组序列中筛选到Z和W染色体同源且W染色体特异性插入、长度为69bp的标记序列,根据其侧翼保守序列设计引物,进一步建立了圆斑星鲽遗传性别鉴定方法,可以快速、准确和高效的识别圆斑星鲽遗传性别。由于该标记在雌雄个体中都可扩增出目的条带,因此有效避免了检测结果的假阴性。另外,该标记具有可以根据琼脂糖凝胶电泳结果进行遗传性别快速鉴定的特点,大大缩短了鉴定的时间,而且适用于在养殖场简易实验条件下进行批量化鉴定,节约了检测成本,并提高了在养殖场实地检测圆斑星鲽遗传性别的工作效率和可操作性。

主权项:1.一种圆斑星鲽性别鉴定方法,其特征在于:所述鉴定方法是通过检测圆斑星鲽W和Z染色体性别差异DNA片段是否存在于扩增产物中,来鉴别圆斑星鲽性别;所述的性别差异DNA片段位于W染色体上,其核苷酸序列如下:AAAAAAAAAACACATTTACAGATACTCACACAAAAGCTGAAAATAAATCAAATAATAGTCTGGTCAAAT,如SEQIDNO:3所示;所述鉴定方法包括以下步骤:(1)根据SEQIDNO:1和SEQIDNO:2设计得到鉴定圆斑星鲽遗传性别的PCR引物;SEQIDNO:1核苷酸序列为CTCACACTGCGGACTCCATCCAGAGGTCTCTCATCAACACCACTAGTTTTACTGCAGAGAAACACAATTGTCACCCAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAACACATTTACAGATACTCACACAAAAGCTGAAAATAAATCAAATAATAGTCTGGTCAAATAAATACAGGATTGGAAATACCTGCCCTGTGACAGCTCACAAAGTAAAGCCAGT;SEQIDNO:2核苷酸序列为CTCACACTGCGGACTCCATCCAGAGGTCTCTCATCAACACCACTAGTTTTACTGCAGAGAAACACAATTGTCACCCAAAAAAAAAAAAAATAAAATACAGGATTGGAAATACCTGCCCTGTGACAGCTCACAAAGTAAAGCCAGT;(2)对待测个体的DNA样本进行PCR扩增;(3)琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物,根据PCR扩增结果,鉴定圆斑星鲽遗传性别;所述PCR引物的上游引物和下游引物序列分别为:上游引物:5′-CTCACACTGCGGACTCCATC-3′,如SEQIDNO:4所示;下游引物:5′-ACTGGCTTTACTTTGTGAGCTG-3′,如SEQIDNO:5所示;PCR扩增结果显示只扩增出长度为145bp的DNA片段,则待测个体为雄性;PCR扩增结果显示扩增出长度分别为145bp和214bp的两种DNA片段,则待测个体为雌性。

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权利要求:

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