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申请/专利权人：武汉大学
摘要：提供了用于简单、无仪器且灵敏的方法的组合物和方法，该方法能够对目的核酸分子进行快速、即时检测。这基于一个令人惊讶的发现，即扩增及基于CRISPR的切割和检测的相对效率可以调整为利于扩增，直到生成足够的扩增产物实现检测。示例方法包括设计向导RNA和引物以靶向非最优PAM序列，或序列工程化Cas核酸酶以降低其在与该向导RNA形成核糖核蛋白或者结合或切割底物核酸方面的活性。
主权项：1.一种混合物在制备用于一步检测靶多核苷酸的诊断试剂中的应用，所述混合物包含a聚合酶、b脱氧核苷三磷酸（dNTP）、c用于扩增所述靶多核苷酸的引物、dCRISPR相关（Cas）核酸酶、和e包含与所述靶多核苷酸上的靶片段互补的间隔片段的向导RNA，所述混合物在所述应用中使得所述聚合酶有效扩增所述靶多核苷酸，同时所述Cas核酸酶能够切割经扩增的靶多核苷酸，其中所述向导RNA的靶片段包括或邻近可由所述Cas核酸酶识别的原型间隔子邻近基序PAM序列，所述PAM序列是非经典的（non-canonical）；其中所述Cas核酸酶为LbCas12a，并且所述PAM序列选自由以下组成的组：VTTV、TCTV、TTVV、TRTV、TTNT和YYYN，其中N表示任何核苷酸，TTTV除外。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 武汉大学 用于即时核酸检测的组合物和方法
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