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一种重金属污染低毒环境肝癌细胞模型的构建方法和应用 

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申请/专利权人:广西医科大学

摘要:一种重金属污染低毒环境肝癌细胞模型的构建方法和应用,本申请根据在重金属低毒环境耐受细胞株模型,可以为研究在特殊区域就特定因素导致的癌症治疗研究,为了解不同环境因素致癌的差异性科学研究提供一个可行的研究模型,并为该区域临床治疗提供科研依据。

主权项:1.一种重金属污染低毒环境肝癌细胞模型的构建方法和应用,其特征在于,包括以下步骤:S1:通过采用细胞培养和动物模型来探索最低致癌剂量、毒理学研究,结合人体流行病学研究来确定重金属毒性效应及其剂量-反应关系,从而确定重金属在人体内导致疾病的最低检测量;S2:根据S1得到的最低检测量,在此基础上选取G2、Huh-7肝癌细胞株,通过cck8实验对不同浓度梯度的重金属对细胞毒性进行检测,明确细胞的最大致死量,半数致死量,并通过正交分析确定合适染毒剂量;S3:通过S2中确定的浓度梯度,进行72小时生长曲线绘制,确定急性低毒对细胞的杀伤作用,选取稳态浓度进行后期长时间染毒模型的构建;S4:根据S3确定的浓度分别对G2、Huh两株肝癌细胞,进行周期为21天的长染毒实验,分别设置7天、14天、21天为观察检测时间点,通过显微成像对不同时间段细胞的生产情况进行对比,观察发现在不同染毒时间点,癌细胞形态发生明显的变化;S5:通过对0小时、24小时、48小时染毒癌细胞进行细胞划痕实验对比发现在不同剂量染毒环境中,对癌细胞活力是否有影响;S6:通过流式分析技术,分别对不同剂量不同时间点的G2、Hup细胞的凋亡情况进行检测,观察不同染毒环境下的细胞与正常组细胞,随着时间点的推移在各染毒浓度,均与对照组产生明显差异。经过长时间染毒,可以构建出重金属低毒环境耐受癌细胞模型;S7:利用所得到的重金属低毒环境耐受细胞株模型,为研究在特殊区域就特定因素导致的癌症治疗研究,为了解不同环境因素致癌的差异性科学研究提供一个可行的研究模型,并为该区域临床治疗提供科研依据。

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