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申请/专利权人：徐州医科大学
摘要：本发明公开了一种利用链内核酸自我连接制备单链环状DNA的方法，将待制备成单链环状DNA的核酸先制备成可连接成环的单链DNA分子，在单链DNA分子的5’端做磷酸化修饰，将修饰后的单链DNA分子进行退火，得到退火产物，退火产物在DNA连接酶的作用下进行连接反应，得到连接产物，采用核酸外切酶处理连接产物中未成环的DNA，然后回收，得到单链环状DNA。该方法可实现环状DNA的高效、大量制备，并且纯度高、成本低，制备的单链环状DNA可以采用滚环扩增技术进行核酸扩增，实现核酸的检测，与现有滚环扩增技术检测核酸方法相比，该方法在核酸检测中可达到更高度灵敏的水平。
主权项：1.一种利用链内核酸自我连接制备单链环状DNA的方法，其特征在于，包括如下步骤：1将待制备成单链环状DNA的核酸模板先制备成可自我连接成环的单链DNA分子，然后在单链DNA分子的5’端做磷酸化修饰，得到修饰后的单链DNA分子；2将修饰后的单链DNA分子进行退火，得到退火产物；3往退火产物中加入DNA连接酶，进行连接反应，得到连接产物，纯化后，得到单链环状DNA；步骤1中，所述待制备成单链环状DNA的核酸模板为miRNA、RNA或DNA。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 徐州医科大学 一种利用链内核酸自我连接制备单链环状DNA的方法及应用
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