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申请/专利权人：诸城市浩天药业有限公司
摘要：本发明属于微生物发酵技术领域，公开了一种吡咯喹啉醌促进甘氨酸转化为5‑氨基乙酰丙酸的方法，该方法是在利用含5‑氨基乙酰丙酸合成酶的谷氨酸棒状杆菌发酵生产5‑氨基乙酰丙酸时，在发酵初期先添加百分之一发酵液体积的0.1molL的PQQ溶液，然后在加入诱导剂和甘氨酸后的零小时、18小时、36小时和54小时分别加入不同量的PQQ溶液进行发酵生产。本发明有效提高了甘氨酸转化为5‑ALA的转化率，可以将5‑ALA的产量最高可提高10％以上，同时缩短了发酵周期，降低了生产成本，具有显著的经济效益和技术进步。
主权项：1.吡咯喹啉醌促进甘氨酸转化为5-氨基乙酰丙酸的方法，其特征在于：包括以下步骤：a.将含5-氨基乙酰丙酸合成酶的谷氨酸棒状杆菌在LB固体培养基上涂布后，放于37℃环境内培养16h；b.将步骤a中平板挑取1～2cm2的菌苔接种于LB液体培养基，220rpm，37℃培养，至菌液OD600值为1.6～1.8；c.先配制不同浓度的PQQ溶液并过滤除菌，然后将步骤b中的菌液接种到2.5L发酵液中，接种量为培养基重量的5～10％；发酵液初始pH值为7.0，初始空气流量为0.5m3L，维持压力为0.05Mpa，发酵温度28～32℃，转速为180～200rpm进行发酵，发酵前加入25ml0.1molL的PQQ溶液；发酵过程中搅拌转速根据溶氧量自动偶联设定，温度由发酵罐自动控制，pH通过加入体积分数为50％氨水维持，发酵24h前保持DO值为20～30％，培养至菌液OD600值为30～60，加终浓度为0.1mmolL的IPTG诱导，并加入甘氨酸溶液，使得发酵液中甘氨酸浓度为4gL，30℃恒温发酵72h，至溶氧持续上升且氨水不再消耗时停止发酵，取样检测产物5-ALA含量；在加入甘氨酸溶液后的72h发酵时间内，分四次加入PQQ溶液。
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权利要求：
百度查询： 诸城市浩天药业有限公司 吡咯喹啉醌促进甘氨酸转化为5-氨基乙酰丙酸的方法
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