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申请/专利权人:杭州微远生物科技有限公司
摘要:本发明公开了一种达泊西汀手性中间体的酶催化合成方法,向反应容器中加入表达醛酮还原酶醇脱氢酶的重组大肠杆菌湿菌体、表达甲酸脱氢酶的重组大肠杆菌湿菌体、缓冲液、底物、助溶剂、甲酸铵和辅酶,在25~35℃下反应2~24小时,萃取、分离、旋蒸后,即得达泊西汀手性中间体。本发明反应条件温和、对环境友好,具有高度的区域选择性和立体选择性,而且避免了手性拆分和产物中重金属残留,恰好弥补了化学方法的不足之处,转化率高,手性纯度高,酶用量少,制备成本低。
主权项:1.一种达泊西汀手性中间体的酶催化合成方法,其特征在于,向反应容器中加入表达醛酮还原酶醇脱氢酶的重组大肠杆菌湿菌体、表达甲酸脱氢酶的重组大肠杆菌湿菌体、缓冲液、底物、助溶剂、甲酸铵和辅酶,在25~35℃下反应2~24小时,萃取、分离、旋蒸后,即得达泊西汀手性中间体;所述底物为3-氯苯丙酮或3-羟基苯丙酮;1L反应体系中各原料的用量配比为:表达醛酮还原酶醇脱氢酶的重组大肠杆菌湿菌体10~200g,表达甲酸脱氢酶的重组大肠杆菌湿菌体10~200g,底物20g~100g,助溶剂50~500mL,甲酸铵0.2~1moL,辅酶0.1~2.5mmoL,缓冲液余量。
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