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申请/专利权人：信天翁生物科技(广州)有限公司
摘要：本发明提供了一种基于磁珠法的核酸提取方法，包括以下步骤：步骤一、磁珠表面修饰；步骤二、磁珠悬浮液制备；步骤三、样品裂解孵育；步骤四、磁吸吸附；步骤五、磁珠洗涤除杂。本发明通过对磁珠进行表面修饰，制得磷脂双分子层磁珠，能够降低核酸与磁珠之间的界面张力，使得核酸更容易与磁珠表面接触并结合。本发明在样品裂解孵育时采用特定成分的裂解液并结合紫光灯照射。通过对磁珠表面修饰、采用特定裂解液裂解孵育，使得本发明的磁珠与核酸特异性结合程度高，只经一次洗涤，免去了洗脱步骤，制得的得到磁珠‑核酸复合物可直接作为后续核酸检测靶标，减少了多次洗涤和洗脱过程中造成的核酸损失和稀释，提高了核酸的浓度和纯度。
主权项：1.一种基于磁珠法的核酸提取方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、磁珠表面修饰：在40-60℃下将磁性微球、磷脂酰肌醇、甲醇以80-100rmin震荡混匀60-90s，向上述混合液中缓慢加入3-吗啉丙磺酸、氯化钠并将pH调节至6.8-7.2，反应25-35min，并采用无菌去离子水清洗磁珠微球，得到磷脂双分子层磁珠；步骤二、磁珠悬浮液制备：将温吞20、聚乙二醇加入到生理盐水中，以100-200rmin搅拌1-3min，加入磷脂双分子层磁珠以20-40rmin震荡混匀10-20s，得到磁珠悬浮液；步骤三、样品裂解孵育：取样品加入到1.5mL的离心试管中，向上述离心试管中加入磁珠混悬液、细胞裂解液以20-40rmin震荡混匀10-20s，在24-26℃并在紫光灯照射下孵育4-6min；步骤四、磁吸吸附：将上述离心管置于磁力架中，静置1-2min，使磁珠完全被吸附到磁力架上，使用移液枪吸取并弃去上清液；步骤五、磁珠洗涤除杂：向上述离心管中加入洗涤液，20-40rmin震荡混匀20-30s，静置15-25s，使磁珠完全被吸附到磁力架上，使用移液枪吸取并弃去上清液，得到磁珠-核酸复合物，完成核酸提取。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 信天翁生物科技(广州)有限公司 一种基于磁珠法的核酸提取方法
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