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申请/专利权人：广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所

摘要：本发明公开了一种利用丝核菌促进金线莲原球茎分化与菌根化繁育及栽培的方法，是以金线莲种子无菌播种萌发获得的原球茎为材料，利用丝核菌和木屑、椰糠、泥炭土、花生壳等配制共生培养基质及共生栽培基质，诱导原球茎分化并生长成完整的菌根化植株，再进行共生栽培。该方法利用金线莲种子无菌播种可快速获得数量巨大的原球茎的优势，使用天然的原材料配制共生培养基质和共生栽培基质，在短时间内可繁育获得大量金线莲菌根化种苗；获得的优质菌根化种苗可直接移栽到共生栽培基质上进行栽培，成活率和鲜重增长率高；有效解决金线莲优质种苗匮乏和人工种植难度大的实际问题，对于金线莲产业的发展具有重大意义。

主权项：1.一种利用丝核菌促进金线莲原球茎分化与菌根化繁育及栽培的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1：无菌播种萌发获得原球茎：将经过消毒处理的金线莲种子播种于萌发增殖培养基上，培养30～50d萌发得到无菌原球茎，所述萌发增殖培养基为含6-苄基腺嘌呤2.0～3.0mgL、萘乙酸0.3～0.5mgL、香蕉70～100gL、活性炭1.0～2.0gL、蔗糖20～30gL和琼脂3.5～5.5gL的12MS培养基，pH值为5.8～6.2；步骤2：原球茎与丝核菌共生培养：先将丝核菌菌液接种到共生培养基质上培养3～7d，然后再将原球茎接种到共生培养基质上，在共生培养条件下培养20～30d，原球茎逐步膨大并伸长，形成粗壮的根状茎；所述共生培养基质为；含杂木屑50～70％、蛇木屑20～30％、椰糠10～20％，另外添加葡萄糖1～1.5％、硫酸铵0.6～0.8％、磷酸二氢钾0.5～0.7％、氯化钴0.03～0.05％，含水量为60～70％，基质混合均匀经过高温灭菌后备用；所述共生培养条件为：用黑色遮光布进行遮光培养，遮光率为80～100％，温度为25～27℃；湿度60～70％；步骤3：根状茎分化培养成苗：在共生分化培养条件下培养20～40d，期间在共生培养基质上补充1～2次丝核菌菌液，根状茎分化成带叶片的芽苗，并逐渐长高和诱导出根系，形成完整的金线莲菌根化植株；所述共生分化培养条件为：利用日光灯进行间歇光照培养，光照度为1500～2000lx；所述间歇光照培养时所用的光源为复合波长的日光灯，光照时间为12～16hd；温度为25～27℃；湿度60～70％；步骤4：菌根化苗移栽：先将丝核菌菌液接种到共生栽培基质上培养3～5d，待絮状菌丝分布到60～80％基质表面时，再将菌根化植株移栽到共生栽培基质上栽培，30d的成活率为82.5～96.5％，120d的鲜重增长率达85.9～95.5％；所述共生栽培基质为：泥炭土、花生壳和椰糠按照体积3～4：1：1的比例混合配制而成，含水量为50～70％；基质经过高温灭菌后备用；其中，共生真菌为丝核菌的PDA液体菌液，丝核菌从金线莲原生境分离筛选获得，保藏号为CGMCCNo.9728，使用时先从低温保藏的斜面试管活化，然后转接到PDA液体培养基上培养，制备成液体菌种备用，丝核菌在PDA液体菌种中菌落数为100～1000cfumL；步骤1、2、3为培养室内环境进行培养；步骤4为设施大棚内环境，使用双层遮阳网遮阴，荫蔽度为70～80％。

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