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申请/专利权人：深圳希吉亚生物技术有限公司

摘要：本发明公开了一种羰基还原酶突变体及其制备方法和应用；所述羰基还原酶突变体包括如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列在第42位、第45位、第66位、第178位和第205位中的至少一个氨基酸处的突变；相比野生型羰基还原酶，羰基还原酶突变体具有更优良的比酶活、耐酸性；其中羰基还原酶突变体H45DP66AV178P的比酶活相对野生型提升了2.6倍，且最适pH值从6.0下调到了5.0，耐酸性得到显著提升；将突变体与葡萄糖脱氢酶偶联，6h内转化底物浓度高达350gL，转化率达99％，终产物的ee值达99.4％；而且羰基还原酶突变体的制备过程简单，具有广阔的应用前景。

主权项：1.一种羰基还原酶突变体，所述羰基还原酶突变体的氨基酸序列为以下任一项：1选自如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列在第42位突变为甘氨酸；2选自如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列在第45位突变为天冬氨酸；3选自如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列在第66位突变为丙氨酸；4选自如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列在第178位突变为脯氨酸；5选自如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列在第205位突变为丙氨酸；6选自如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列在第42位突变为甘氨酸、在第45位突变为天冬氨酸；7选自如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列在第42位突变为甘氨酸、在第66位突变为丙氨酸；8选自如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列在第42位突变为甘氨酸、在第178位突变为脯氨酸；9选自如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列在第42位突变为甘氨酸、在第205位突变为丙氨酸；10选自如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列在第45位突变为天冬氨酸、在第66位突变为丙氨酸；11选自如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列在第45位突变为天冬氨酸、在第178位突变为脯氨酸；12选自如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列在第45位突变为天冬氨酸、在第205位突变为丙氨酸；13选自如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列在第66位突变为丙氨酸、在第178位突变为脯氨酸；14选自如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列在第66位突变为丙氨酸、在第205位突变为丙氨酸；15选自如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列在第178位突变为脯氨酸、在第205位突变为丙氨酸；16选自如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列在第42位突变为甘氨酸、在第45位突变为天冬氨酸、在第66位突变为丙氨酸；17选自如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列在第45位突变为天冬氨酸、在第66位突变为丙氨酸、在第178位突变为脯氨酸；18选自如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列在第45位突变为天冬氨酸、在第66位突变为丙氨酸、在第205位突变为丙氨酸。

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