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申请/专利权人:云合(天津)生物技术有限公司
摘要:本发明提供了醇脱氢酶突变体、双酶共表达重组菌及其在合成S‑玻色因中的应用,所述的醇脱氢酶KPADH突变体的氨基酸序列是由SEQIDNO:1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列。本发明所述的双酶共表达重组菌是以廉价易得的木糖和葡萄糖作为底物,以两种脱氢酶共表达细胞为催化剂,可高效制备出高价值的化妆品原料玻色因。
主权项:1.一种醇脱氢酶KPADH突变体,其特征在于:所述的醇脱氢酶KPADH突变体的氨基酸序列是由SEQIDNO:1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列,所述的突变体为如下(1)-(33)中任一种:(1)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸;(2)第72位赖氨酸突变为甘氨酸;(3)第127位酪氨酸突变为亮氨酸;(4)第132位苏氨酸突变为天冬酰胺;(5)第218位异亮氨酸突变为丙氨酸;(6)第248位苏氨酸突变为异亮氨酸;(7)第300位天冬酰胺突变为脯氨酸;(8)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸,且第72位赖氨酸突变为甘氨酸;(9)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸,且第127位酪氨酸突变为亮氨酸;(10)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸,且第132位苏氨酸突变为天冬酰胺;(11)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸,且第218位异亮氨酸突变为丙氨酸;(12)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸,且第248位苏氨酸突变为异亮氨酸;(13)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸,且第300位天冬酰胺突变为脯氨酸;(14)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸,且第72位赖氨酸突变为甘氨酸,且第127位酪氨酸突变为亮氨酸;(15)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸,且第72位赖氨酸突变为甘氨酸,且第132位苏氨酸突变为天冬酰胺;(16)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸,且第72位赖氨酸突变为甘氨酸,且第218位异亮氨酸突变为丙氨酸;(17)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸,且第72位赖氨酸突变为甘氨酸,且第248位苏氨酸突变为异亮氨酸;(18)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸,且第72位赖氨酸突变为甘氨酸,且第300位天冬酰胺突变为脯氨酸;(19)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸,且第72位赖氨酸突变为甘氨酸,且第127位酪氨酸突变为亮氨酸,且第132位苏氨酸突变为天冬酰胺;(20)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸,且第72位赖氨酸突变为甘氨酸,且第127位酪氨酸突变为亮氨酸,且第218位异亮氨酸突变为丙氨酸;(21)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸,且第72位赖氨酸突变为甘氨酸,且第127位酪氨酸突变为亮氨酸,且第248位苏氨酸突变为异亮氨酸;(22)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸,且第72位赖氨酸突变为甘氨酸,且第127位酪氨酸突变为亮氨酸,且第300位天冬酰胺突变为脯氨酸;(23)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸,且第72位赖氨酸突变为甘氨酸,且第127位酪氨酸突变为亮氨酸,且第132位苏氨酸突变为天冬酰胺,且第218位异亮氨酸突变为丙氨酸;(24)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸,且第72位赖氨酸突变为甘氨酸,且第127位酪氨酸突变为亮氨酸,且第132位苏氨酸突变为天冬酰胺,且第248位苏氨酸突变为异亮氨酸;(25)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸,且第72位赖氨酸突变为甘氨酸,且第127位酪氨酸突变为亮氨酸,且第132位苏氨酸突变为天冬酰胺,且第300位天冬酰胺突变为脯氨酸;(26)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸,且第72位赖氨酸突变为甘氨酸,且第127位酪氨酸突变为亮氨酸,且第132位苏氨酸突变为天冬酰胺,且第218位异亮氨酸突变为丙氨酸,且第248位苏氨酸突变为异亮氨酸;(27)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸,且第72位赖氨酸突变为甘氨酸,且第127位酪氨酸突变为亮氨酸,且第132位苏氨酸突变为天冬酰胺,且第218位异亮氨酸突变为丙氨酸,且第300位天冬酰胺突变为脯氨酸;(28)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸,且第127位酪氨酸突变为亮氨酸,且第132位苏氨酸突变为天冬酰胺,且第218位异亮氨酸突变为丙氨酸,且第248位苏氨酸突变为异亮氨酸,且第300位天冬酰胺突变为脯氨酸;(29)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸,且第72位赖氨酸突变为甘氨酸,且第132位苏氨酸突变为天冬酰胺,且第218位异亮氨酸突变为丙氨酸,且第248位苏氨酸突变为异亮氨酸,且第300位天冬酰胺突变为脯氨酸;(30)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸,且第72位赖氨酸突变为甘氨酸,且第127位酪氨酸突变为亮氨酸,且第218位异亮氨酸突变为丙氨酸,且第248位苏氨酸突变为异亮氨酸,且第300位天冬酰胺突变为脯氨酸;(31)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸,且第72位赖氨酸突变为甘氨酸,且第127位酪氨酸突变为亮氨酸,且第132位苏氨酸突变为天冬酰胺,且第248位苏氨酸突变为异亮氨酸,且第300位天冬酰胺突变为脯氨酸;(32)第72位赖氨酸突变为甘氨酸,且第127位酪氨酸突变为亮氨酸,且第132位苏氨酸突变为天冬酰胺,且第218位异亮氨酸突变为丙氨酸,且第248位苏氨酸突变为异亮氨酸,且第300位天冬酰胺突变为脯氨酸;(33)第24位天冬酰胺突变为半胱氨酸,且第72位赖氨酸突变为甘氨酸,且第127位酪氨酸突变为亮氨酸,且第132位苏氨酸突变为天冬酰胺,且第218位异亮氨酸突变为丙氨酸,且第248位苏氨酸突变为异亮氨酸,且第300位天冬酰胺突变为脯氨酸。
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