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申请/专利权人：江苏第二师范学院
摘要：本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas12a的ATP可视化检测系统及检测方法，包括识别探针AP、发卡DNAH1和H2、LbCas12a蛋白、crRNA、transducerDNA、SSG4。该方法利用探针AP识别ATP，触发无酶等温扩增反应，进而激活LbCas12a‑crRNA的核酸酶活性，切割transducerDNA。由于显色反应中的G‑四链体核酸SSG4过氧化物酶活性受到transducerDNA的调控，ATP诱发的扩增及transducerDNA切割反应可使得SSG4过氧化物酶活性保持，进而催化底物氧化反应使溶液呈显著的蓝绿色。该方法避免了G‑四链体直接作为LbCas12a蛋白‑crRNA复合体切割底物时的核酸酶抗性问题。利用该方法检测ATP时，方法简单，核酸无需化学修饰，检测灵敏度高，可实现基于颜色变化的现场即时检测，在医学检测及生物学研究中具有广泛的应用前景。
主权项：1.一种基于CRISPR-Cas12a的ATP可视化检测系统，其特征在于，包括：识别探针AP、发卡DNAH1、发卡DNAH2、LbCas12a蛋白、crRNA、transducerDNA和G-四链体核酸SSG4；其中，所述识别探针AP由核酸序列Aptamer与核酸序列LC-8经退火后得到；发卡DNAH1和H2为链置换等温扩增反应元件；transducerDNA为单链DNA，是LbCas12a蛋白的反式剪切底物。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 江苏第二师范学院 一种基于CRISPR-Cas12a的ATP可视化检测系统及检测方法
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