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申请/专利权人：陕西师范大学;略阳县科技创新服务中心(略阳县中药材产业发展服务中心、略阳县天麻研究所);汉中荣达天成农业科技有限公司

摘要：本发明公开了一种山慈菇栽培菌种及其制备工艺，其利用辐毛小鬼伞CoprinusradiansN2为母种，经锥形瓶中的液体培养基摇床培养后在发酵罐中进行扩大培养，获得的二级液体菌种直接接入栽培基质中于室内养菌，获得山慈菇栽培菌种。本发明通过优化栽培基质配比和制备工艺，保证上下湿度均匀，菌种生长好，种入地里传菌快且持久，对山慈菇种子接菌、萌发、生长发芽、展叶期间的生长关键环节提供了优质持久的生长营养；同时采用液体接菌制菌的方法，降低了转接代数，菌种活力高、接菌快且省工、省料，感染率少、易成活，生长快。本发明方法培育的菌种，菌种营养供应在90天以上，栽培菌种失活为0％，杂菌感染低，损失低，成本低，且比目前固体菌种生长时间提前了40～50天。

主权项：1.一种山慈菇栽培菌种的制备工艺，其特征在于，包括下述步骤：步骤1：将液体培养基装于锥形瓶中，高温高压灭菌后冷却至室温，接种辐毛小鬼伞CoprinusradiansN2，在摇床上培养至锥形瓶中培养液出现大量白色絮状菌丝或者球状菌球，静置后培养液变得清澈，无明显分层现象，且在无菌条件下通过显微镜观察无细菌感染，作为液体菌种；所述液体培养基是按每1000mL纯净水加入土豆淀粉2.5～3.5g、黄豆粉1.5～2.5g、玉米粉0.8～1.2g、蛋白胨2.5～3.5g、一水葡萄糖15～25g、磷酸二氢钾0.7～0.75g、硫酸镁1.5～2.5g、酵母膏2.5～3.5g配制而成，其pH为7.5～8；所述辐毛小鬼伞CoprinusradiansN2于2023年11月02日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNO：40970；步骤2：将扩大培养基装于发酵罐中，高温高压灭菌后冷却至室温，将步骤1锥形瓶中的液体菌种倒入发酵罐进行扩大培养，培养至发酵罐中出现大量白色絮状菌丝或者球状菌球，静置后培养液变得清澈，无明显分层或者漂浮物出现，通过排气闻到无酸味或者臭味，且在无菌条件下通过显微镜观察无细菌感染，作为二级液体菌种；所述扩大培养基是按每200L纯净水加入土豆淀粉580～620g、黄豆粉580～620g、玉米粉180～220g、蛋白胨580～620g、一水葡萄糖3800～4200g、高纯磷酸二氢钾130～150g、硫酸镁380～420g、酵母膏580～620g配制而成，其pH为7.5～8；步骤3：将栽培基质用装袋机装入耐高温且无毒的塑料袋中，栽培基质装到至距离袋口3～6cm处，中心插入直径2～3mm成型管，套上扣环，用耐高温高压盖子封口后，高温高压灭菌后冷却至室温；所述栽培基质是基质与水质量比1：1.1～1.5的混合物，其pH为6.5～7；所述基质的质量百分比组成为：木屑50％～60％、棉籽壳颗粒20％～28％、麸皮17％～20％、石膏1％～1.5％、白糖1％～1.5％、葡萄糖0.3％～0.6％；步骤4：将步骤3中冷却至室温的袋装栽培基质通过传送带送到接种室，在无菌环境下取下盖子打开塑料袋，拔出成型管，通过接种枪将步骤2发酵罐中的二级液体菌种从成型管形成的通道注入栽培基质内，再用盖子封口；步骤5：通过自动传送带将步骤4中接好菌种的袋装栽培基质输出接种室，装筐送入温度15～25℃、湿度50％～60％的环境室内暗室培养，5～7天后上下倒筐，再继续培养12～15天，获得山慈菇栽培菌种。

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