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申请/专利权人：中国人民解放军海军军医大学;上海市食品药品检验研究院

摘要：本发明涉及生物医药应用技术领域，具体涉及成纤维细胞和角质细胞分化成3D皮肤模型及血管内皮细胞和肝细胞的培养方法。本发明的芯片培养的3D皮肤模型、血管内皮细胞和肝细胞，可同时模拟复杂的三维组织结构和细胞微环境的多功能人源化组织。以此可以实现对体外皮肤组织的制备与评价研究，从而进一步促进皮肤相关疾病发生机制的阐明以及治疗策略的选择。本方法可模拟外源化学品经皮暴露代谢后入血，再至肝产生毒性的体内暴露过程，无论从种属相似性、3R原则或暴露水平上都表明本芯片在评估外源化学品毒性，特别是经皮代谢后具有肝毒性的外源化学品方面比动物模型更有优势。因此，本发明可以为生物医学工程等领域提供新的思路和方法。

主权项：1.成纤维细胞和角质细胞分化成3D皮肤模型及血管内皮细胞和肝细胞的培养方法，所述方法培养的成纤维细胞和角质细胞放置在芯片中完成培养，其特征在于包括以下步骤：S1.先配制成纤维细胞胶原混合物，然后取200-500μL成纤维细胞胶原混合物加到芯片的第一培养室内，最后在37℃凝胶0.5-2h使所述纤维细胞胶原混合物固化，接着在芯片的其它腔室加满10%FBSDMEM培养液，培养6-8天；S2.在上述培养6-8天后，将所述10%FBSDMEM培养液更换为EpidermalizationⅠ，往所述成纤维细胞胶原混合物表面滴加10-100μL角质细胞悬液，控制所述角质细胞在第一培养室的终密度为500-5000个mm2，静置5-20min后，放入培养箱，37℃孵育0.5-2h；最后往第一培养室中缓慢滴加EpidermalizationⅠ至满，所述芯片的其它腔室也加满EpidermalizationⅠ，培养2-4天；S3.在上述培养2-4天后，先将芯片中的EpidermalizationⅠ吸去，然后加满EpidermalizationⅡ，培养1-3天；S4.在上述培养1-3天后，将芯片中的EpidermalizationⅡ吸去，在第二培养室和第三培养室、第一储液室中加满Cornification，进行气-液界面培养，并开始流动，培养6-9天，得到3D皮肤模型。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国人民解放军海军军医大学 上海市食品药品检验研究院 成纤维细胞和角质细胞分化成3D皮肤模型及血管内皮细胞和肝细胞培养方法