首页 专利交易 科技果 科技人才 科技服务 国际服务 商标交易 会员权益 IP管家助手 需求市场 关于龙图腾
 /  免费注册
到顶部 到底部
清空 搜索

一种人乳头瘤病毒中和抗体的高通量检测方法 

买专利卖专利找龙图腾,真高效! 查专利查商标用IPTOP,全免费!专利年费监控用IP管家,真方便!

申请/专利权人:河南中抗医学检验有限公司

摘要:本发明属于检测技术领域,具体涉及一种人乳头瘤病毒中和抗体的高通量检测方法。本发明构建的HPV假病毒分别包含mTagBFP2、EGFP、DsRed和E2‑Crimson四种荧光蛋白报告基因。通过两种、四种HPV假病毒与不同的荧光蛋白报告基因组合,利用这种组合可通过一次单独试验得到两价和四价免疫血清抗体水平,通过三次单独试验得到九价免疫血清抗体水平。本发明的人乳头瘤病毒中和抗体的高通量检测方法简单可靠、重复性好,可同时检测多种HPV病毒的中和抗体水平。

主权项:1.一种人乳头瘤病毒中和抗体的高通量检测方法,其特征在于,包括如下步骤:1假病毒的制备制备假病毒:选择结构基因表达质粒和荧光蛋白报告质粒,不同的结构基因表达质粒与不同的荧光蛋白报告质粒两两组合分别共转染到人胚肾细胞中,以生产不同的HPV假病毒;2假病毒的滴定确定制备的HPV假病毒的病毒滴度;3血清中和抗体的检测铺板与感染:在96孔细胞培养板中预铺细胞,培养至细胞贴壁;随后,用培养基稀释假病毒,得到假病毒稀释液,并将其加入已铺有细胞的96孔板中;血清样本处理:对于定性检测,待检血清稀释;对于定量检测,待检血清作梯度稀释;将血清与假病毒混合,振荡,室温孵育,得到假病毒-血清混合液;感染与培养:将假病毒-血清混合液加入已铺有细胞的96孔板中,同时设置阴性对照和空白对照;结果检测与分析:读取RLU值:使用化学发光计数仪或Florospot荧光斑点计数仪读取每孔的荧光斑点数;对于基于化学发光报告基因的检测方法;通过加入显色底物后观察颜色变化来判断感染情况,颜色变化通过酶联免疫图像分析系统Elispot进行自动扫描并计数;计算感染抑制率:通过比较检测样本与对照的读数差异,计算感染抑制率;中和滴度计算:计算样本的中和滴度IC50。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 河南中抗医学检验有限公司 一种人乳头瘤病毒中和抗体的高通量检测方法

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息,力求客观、公正,但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解,仅供参考使用,不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。