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申请/专利权人:珠海麦得发生物科技股份有限公司
摘要:本发明公开了一种辅酶A转移酶及其筛选方法和在P34HB合成中的应用。本发明通过构建不同来源的辅酶A转移酶重组载体,成功导入嗜盐单胞菌,通过发酵检测共聚物P34HB(聚3‑羟基丁酸‑co‑4‑羟基丁酸)的产量,筛选出高效的辅酶A转移酶,并对该酶进行突变改造及利用融合标签提高菌株P34HB的合成效率。本发明筛选出的辅酶A转移酶及其突变体可弥补生物聚合物过程中的酶缺失,具有潜在的合成工业应用前景。
主权项:1.一种辅酶A转移酶在合成聚3-羟基丁酸-co-4-羟基丁酸中的应用,其特征在于,所述辅酶A转移酶为辅酶A转移酶pct1突变体中的任意一种;所述辅酶A转移酶pct1突变体的氨基酸序列以SEQIDNO.1为参考序列,i第149位谷氨酸和第234位谷氨酸均突变为丙氨酸;ii或第222位缬氨酸突变为丙氨酸;iii或第109位苏氨酸突变为半胱氨酸并且第189位苏氨酸突变为半胱氨酸;iiii或第162位色氨酸突变为丙氨酸并且第228位丝氨酸突变为赖氨酸;iiiii或第307位亮氨酸突变为谷氨酸并且第34位苏氨酸突变为组氨酸。
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