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一种大肠杆菌重组蛋白的纯化方法 

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申请/专利权人:武汉艾默佳华生物科技有限公司

摘要:本公开提供了一种大肠杆菌重组蛋白的纯化方法,包括以下步骤:构建核糖核酸酶‑溶菌酶融合酶的重组表达载体;将核糖核酸酶‑溶菌酶融合酶的重组表达载体转化到大肠杆菌中,诱导融合酶表达;对表达有融合酶的大肠杆菌进行超声破碎,离心,将上清作为融合酶的粗酶液;构建目的蛋白的重组表达载体;将目的蛋白的重组表达载体转化到大肠杆菌中,诱导目的蛋白表达;将融合酶粗酶液加入到表达有目的蛋白的大肠杆菌菌液中,孵育;在孵育之后,加入NaCl,然后加入聚乙烯亚胺,磁力搅拌,静置,抽滤,取上清。本公开的方法可以简化蛋白纯化操作,实现工业上大规模细胞碎片及核酸的快速分离,方便溶液中蛋白的进一步纯化,应用前景良好。

主权项:1.一种大肠杆菌重组蛋白的纯化方法,其特征在于,包括以下步骤:构建核糖核酸酶-溶菌酶融合酶的重组表达载体;将所述融合酶的重组表达载体转化到大肠杆菌中,诱导融合酶表达;对表达有融合酶的大肠杆菌进行超声破碎,离心,将上清作为融合酶的粗酶液;构建目的蛋白的重组表达载体;将所述目的蛋白的重组表达载体转化到大肠杆菌中,诱导目的蛋白表达;将所述融合酶粗酶液加入到表达有目的蛋白的大肠杆菌菌液中,孵育;在所述孵育之后,加入NaCl,然后加入聚乙烯亚胺,磁力搅拌,静置,抽滤,取上清。

全文数据:

权利要求:

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