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用于制备核酸文库的组合物和方法 

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申请/专利权人:广州燃石医学检验所有限公司

摘要:本发明涉及用于制备核酸文库的组合物和方法。在多个方面,本发明公开提供了用于制备核酸文库,如用于多核苷酸测序的方法、组合物、反应混合物、试剂盒和系统。在一些实施方式中,制备方法包括加尾反应、用于连接接头的连接反应,和连接反应之间的扩增反应。

主权项:1.用于制备多核苷酸文库的方法,其特征在于,所述方法包括:a.在第一加尾反应中,通过不依赖模板的聚合反应将第一尾添加至多个目标多核苷酸中的每一个,其中所述第一加尾反应包括第一接头,所述第一接头包含杂交至所述第一尾的悬突;b.在第一连接反应中,将第一接头链连接至所述第一尾;c.使包含所述第一接头链的目标多核苷酸扩增,所述扩增包括通过使杂交至所述第一接头链的第一引物延伸和线性扩增,所述扩增的循环次数为5-25次;所述扩增完成后,反应体系在95℃加热2分钟;d.在第二加尾反应中,通过不依赖模板的聚合反应将第二尾添加至多个所述扩增的目标多核苷酸中的每一个,其中所述第二加尾反应包括第二接头,所述第二接头包含杂交至所述第二尾的悬突;或者,所述第二加尾反应被省略;和e.在第二连接反应中,将第二接头链连接至所述第二尾;所述方法包含:1将多核苷酸片段化以产生所述目标多核苷酸;2使所述目标多核苷酸的一端或两端脱磷酸;3使双-链多核苷酸变性为单链多核苷酸以产生所述目标多核苷酸。

全文数据:

权利要求:

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