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申请/专利权人:福建省农业科学院畜牧兽医研究所
摘要:本发明提供一种鸽轮状病毒A型荧光定量PCR检测的引物和探针及其试剂盒,所述引物序列如下:引物PiRVA‑TF:5’‑CCGAACTGCTCCTGTATGAAT‑3’,引物PiRVA‑TR:5’‑CATTGCCCATTGCTATCCATTT‑3’;所述探针为:探针PiRVA‑probe:5’‑AGTCTGACATCCATTTCATTGCACAACC‑3’,且其5’‑端标记荧光报告基团FAM,在探针的中间和3’‑端分别标记淬灭基团DBQ1,本发明建立的方法灵敏度高、稳定性好、特异性强、重复性好,可用于鸽轮状病毒A型特异性检测,为后续科学研究鸽轮状病毒A型致病机理和开展分子流行病学奠定基础。
主权项:1.一种鸽轮状病毒A型实时荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括鸽轮状病毒A型实时荧光定量PCR检测的引物和探针;所述试剂盒的反应体系为:ProbeqPCRMix2×混合液10μL、10μmolL的上游引物PiRVA-TF和10μmolL的下游引物PiRVA-TR各0.4μL、10μmolL的探针PiRVA-probe0.8μL、模板1μL、水Nuclease-freeWater补足至20μL;反应条件为:95℃预变性120s;95℃10s、58℃30s,共40个循环;所述引物序列如下:引物PiRVA-TF:5’-CCGAACTGCTCCTGTATGAAT-3’,引物PiRVA-TR:5’-CATTGCCCATTGCTATCCATTT-3’;所述探针的序列为:探针PiRVA-probe:5’-AGTCTGACATCCATTTCATTGCACAACC-3’,且其5’-端标记荧光报告基团FAM,在探针的中间和3’-端分别标记淬灭基团DBQ1。
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