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申请/专利权人：广州双溢生物科技有限公司
摘要：本发明属于有效物质技术领域，提供了一种N‑乙酰神经氨酸的制备方法及应用，包括以下步骤：通过PCR技术扩增得到N‑乙酰葡萄糖胺酸转移酶和N‑乙酰甘露糖胺酸合成酶的编码基因，并将克隆得到的基因片段插入到毕赤酵母表达载体中；将构建好的表达载体导入宿主细胞中，在培养基上筛选毕赤酵母细胞；利用甲醇诱导的AOX1启动子在毕赤酵母中表达，对转化成功的酵母菌株进行培养并诱导目标酶的表达；发酵结束后，通过离心、裂解、分离和纯化N‑乙酰神经氨酸；本发明将无菌水、N‑乙酰神经氨酸、六胜肽、绿茶提取物、葡萄籽提取物、透明质酸、甘油、角鲨烷、腺苷和水解大豆蛋白结合，得到的有效物质，具有抗衰老、保湿和抗氧化功能，还能促进胶原蛋白的生成。
主权项：1.一种N-乙酰神经氨酸的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：S1、从供体生物中通过PCR技术扩增得到N-乙酰葡萄糖胺酸转移酶和N-乙酰甘露糖胺酸合成酶的编码基因，并将克隆得到的基因片段插入到毕赤酵母表达载体pPICZ中；S2、将构建好的表达载体通过电穿孔法导入宿主酵母细胞中，利用载体上的抗生素抗性基因作为选择性标记，在含有相应抗生素的培养基上筛选成功转化的毕赤酵母细胞；S3、利用甲醇诱导的AOX1启动子在毕赤酵母中表达，对转化成功的酵母菌株进行培养并诱导N-乙酰葡萄糖胺酸转移酶和N-乙酰甘露糖胺酸合成酶的表达；S4、发酵结束后，通过离心收集发酵液中含有N-乙酰神经氨酸的酵母细胞，再通过高压均质或超声波处理裂解细胞，释放胞内的N-乙酰神经氨酸，并对裂解后的细胞悬浮液进一步分离和纯化N-乙酰神经氨酸。
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百度查询： 广州双溢生物科技有限公司 一种N-乙酰神经氨酸的制备方法及应用
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