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申请/专利权人：云南省寄生虫病防治所

摘要：本发明公开了一种重要虫媒病毒性疾病多重荧光定量PCR检测试剂盒及方法，属于分子生物学和核酸检测技术领域。该方法包括了登革病毒、寨卡病毒、基孔肯亚病毒、乙脑病毒、黄热病病毒各自的捕获探针组、连接探针组以及qPCR扩增引物、Taqman探针组。本发明基于各病毒基因序列的靶向捕获技术可在不进行核苷酸序列提取的情况下对血清血浆样本中上述5种病毒进行定性和定量分析。本发明实现了用1对引物、5条荧光探针对微量样本中5种病毒的免核酸提取、免反转录的多重实时定性定量检测，极大地降低了检测成本，为登革病毒、寨卡病毒、基孔肯亚病毒、乙脑病毒、黄热病病毒的快速高效检测提供了有效的新工具。

主权项：1.一种登革病毒、寨卡病毒、基孔肯亚病毒、乙脑病毒、黄热病病毒的多重qPCR检测用引物和探针，其特征在于，所述引物和探针的组成如下：（1）登革病毒的探针为捕获探针和连接探针，所述捕获探针如SEQIDNO：1和SEQIDNO：5所示，所述连接探针如SEQIDNO：2-4所示；（2）寨卡病毒的探针为捕获探针和连接探针，所述捕获探针如SEQIDNO：6和SEQIDNO：10所示，所述连接探针如SEQIDNO：7-9所示；（3）基孔肯亚病毒的探针为捕获探针和连接探针，所述捕获探针如SEQIDNO：11、SEQIDNO：12和SEQIDNO：15所示，所述连接探针如SEQIDNO：13和SEQIDNO：14所示；（4）乙脑病毒的探针为捕获探针和连接探针，所述捕获探针如SEQIDNO：16、SEQIDNO：17和SEQIDNO：20所示，所述连接探针如SEQIDNO：18和SEQIDNO：19所示；（5）黄热病病毒的探针为捕获探针和连接探针，所述捕获探针如SEQIDNO：21、SEQIDNO：33和SEQIDNO：24所示，所述连接探针如SEQIDNO：22、SEQIDNO：23和SEQIDNO：32所示；（6）登革病毒、寨卡病毒、基孔肯亚病毒、乙脑病毒和黄热病病毒的引物，所述引物为qPCR扩增引物，所述qPCR扩增引物如SEQIDNO：25和SEQIDNO：26所示；（7）登革病毒、寨卡病毒、基孔肯亚病毒、乙脑病毒和黄热病病毒的探针所组成的Taqman探针组，所述探针为特异荧光探针，所述Taqman探针组如SEQIDNO：27-31所示。

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