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申请/专利权人：海南大学
摘要：本发明提供一种参薯原生质体的制备方法与应用，本发明包括以下步骤：取参薯组培苗嫩叶，并切成0.5‑1.0mm的条带；在切割过程中，将叶片放置在用甘露醇浸泡的滤纸上，并将叶片放入酶溶液中酶解3‑9h；所述酶溶液包括0.4‑1.2ww％纤维素酶、0.5‑1.5ww％离析酶、0.01～0.03ww％果胶酶；用W5溶液洗涤，过滤，过滤时用W5溶液洗涤，过滤后，通过离心收集叶片释放的原生质体，并将其重新悬浮在W5溶液中。本发明可以获得更高的参薯原生质体产量，且原生质体活力达到92％以上。本发明可以高效的获得大量高活力的参薯原生质体，为蛋白质亚细胞定位以及基因功能分析提供良好的实验材料。
主权项：1.一种参薯原生质体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1取参薯组培苗嫩叶，并切成0.5-1.0mm的条带；在切割过程中，将叶片放置在用甘露醇浸泡的滤纸上，并将叶片放入酶溶液中酶解3-9h；所述酶溶液包括0.4-1.2ww％纤维素酶、0.5-1.5ww％离析酶、0.01～0.03ww％果胶酶；所述酶溶液中还包括质量浓度0.2～0.4wt％半胱氨酸和12～15mMEDTA；2用W5溶液洗涤，过滤，过滤时用W5溶液洗涤，过滤后，通过离心收集叶片释放的原生质体，并将其重新悬浮在W5溶液中；最后，将原生质体离心并重新悬浮在W5溶液中。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 海南大学 一种参薯原生质体的制备方法与应用
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