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申请/专利权人:南京九虎古方中医研究院有限公司
摘要:本发明提供了一种解酒护肝防宿醉的中药组合物及其制备方法。本发明采用微生物发酵法制备中药组合物,也即中药材酒虎膏。配料主要采用了药食同源的中药材,主要成分有黄芩、泽泻、葛花、枳椇子等。本发明采用的不溶性黄芩多糖有利于防止酒精性肝损伤及其酒精性代谢紊乱,并使用葛根素粗提液来治疗乙醇诱发的代谢异常和肝损伤,可以防治酒精中毒。制备过程包括浸泡煎煮熬等工序,并加入生物发酵过程,最终制备的酒虎膏中药材不仅具有解酒和防宿醉作用,还具有减轻酒精诱导肝细胞损伤和修复肝细胞损伤促进肝细胞再生的能力。特别地,本发明的葛根素粗提液与不溶性黄芩多糖重量份比值在10:1的情况下得到的中药材具有显著减轻肝细胞病变程度的能力。
主权项:1.一种解酒护肝防宿醉的中药组合物的制备方法,其特征在于:其具体制备步骤如下:S1、将黑曲霉CICC2160划线接种于PDA斜面,28℃培养65~75h后斜面长满黑色孢子;无菌条件下,取1环孢子接入10mL已灭菌的含0.1%吐温-80的0.85%生理盐水中摇匀,即得菌悬液浓度为2×107CFUmL~6×107CFUmL的黑曲霉菌悬液;称取粒径为0.4~0.5mm葛根渣9~10g,麦麸5~6g,加入蒸馏水10~14mL得到固体发酵初始培养基,再将培养基于高压灭菌锅内120~130℃,灭菌30~40min备用,取10~12g制备的固态发酵培养基于锥形瓶中,灭菌后接入1mL黑曲霉菌悬液,振荡锥形瓶使菌悬液尽量均匀分布于培养基中在紫外灯照射8min后在有氧环境下28℃发酵24h,发酵结束后,取出一半发酵物料置于另一锥形瓶中,在两个发酵物料锥形瓶中各加入90~100mL70%乙醇溶液,摇匀后置于80℃恒温水浴中回流提取180~200min,期间每30min振摇一次锥形瓶,最后将瓶内物料进行抽滤,滤液合并即为葛根素粗提液;S2、向黄芩粉末中加入无水乙醇浸没黄芩粉末,浸泡并搅拌12~14h,重复操作2~4次,40~60℃烘干,得到脱脂黄芩粉末;称取干燥的脱脂黄芩粉末,按料液比1∶20(gmL)加入超纯水,沸水浴提取2~5h,过滤,弃去滤液,收集残渣重复提取2次;向滤渣中按料液比1∶30(gmL)加入0.5molLNaOH溶液,在4℃冰箱中静置12~14h,6000~8000rmin离心20~30min,收集上清液,向上清液中加入冰醋酸,调节pH值至7,离心并收集胶状沉淀,用超纯水洗涤沉淀,真空冷冻干燥,得到不溶性黄芩多糖;S3、将植物乳杆菌接种于MRS固体培养基进行斜面活化,培养温度为37℃,恒温培养活化24h,将活化好的菌种再次接到LB培养基,同样条件下进行振荡培养,直到菌种的对数生长期中后期,得到浓度为108CFUmL的植物乳杆菌菌液,备用;按重量份分别称取中药材泽泻、炒白术、滑石、荷叶、葛花、乌梅和银耳各100~120份,并分别磨成0.4mm~0.005mm的粉状颗粒,混合后加8~10倍重量份水煎煮1~2h后,过滤,滤渣加入5倍重量份水煎煮1~2h,过滤,合并2次滤液并加热熬煮至12的体积,按重量份记为100份,接着向上述熬制至12体积的药液中按重量份加入黄连1~3份,党参1~3份,姜半夏1~3份,甘草0.1~3份,焦神曲0.1~3份,焦麦芽0.5~2份,枳椇子0.5~2份,干姜0.1~2份,青皮0.1~2份,陈皮0.1~2份,当归0.1~2份、烊化好的黄明胶0.1~2份、阿胶0.1~2份和低聚异麦芽糖0.1~2份并加水30~35份蒸煮3~4h后,接入8~10份浓度为108CFUmL的植物乳杆菌菌液,并在温度为37℃有氧条件下发酵4~7天,所得发酵液过滤取上清液,在90份上清液中加入30~40份步骤S1制备的葛根素粗提液和步骤S2制备的不溶性黄芩多糖3~4份混合均匀后65~75℃加热10h,再转移至容器内10~12h用小火缓慢炆加热至固态,即为解酒护肝防宿醉的中药组合物,也叫酒虎膏。
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