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申请/专利权人：中国医学科学院医药生物技术研究所

摘要：本发明涉及一种用于筛选核酸适配体的磁性酶反应器、其制备方法及应用。具体的，磁性酶反应器的制备方法包括如下步骤：1将Fe3O4与MPS通过水解缩聚反应制备得到中间聚合物Fe3O4@MPS；然后将VEC作为单体与Fe3O4@MPS通过自由基聚合反应得到磁性聚合物Fe3O4@MPS@pVEC；2将5’‑磷酸二酯酶PDE与步骤1制备得到的Fe3O4@MPS@pVEC在缓冲溶液中混合反应12h～24h，得到所述的磁性酶反应器。本发明还涉及所述的磁性酶反应器在筛选核酸适配体中的应用。

主权项：1.一种用于筛选核酸适配体的磁性酶反应器的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：1将Fe3O4与MPS通过水解缩聚反应制备得到中间聚合物Fe3O4@MPS；然后将VEC作为单体与Fe3O4@MPS通过自由基聚合反应得到磁性聚合物Fe3O4@MPS@pVEC；所述水解缩聚反应为：将Fe3O4、乙醇和MPS在室温下，以30rmin～60rmin的搅拌转速搅拌反应24h～48h；Fe3O4、乙醇和MPS的用量比例为160mg～240mg:80mL～120mL:5mL～7mL；所述自由基聚合反应为：Fe3O4@MPS、引发剂偶氮二异丁腈2,2’-Azobis2-methylpropionitrile，AIBN、4-乙烯基-1,3-二氧戊环-2-酮4-Vinyl-1,3-dioxolan-2-one，VEC和1,4二氧六环1,4-Dioxane的容器充满氮气，然后在80℃～100℃下，以30rmin～60rmin的搅拌转速搅拌反应24h～48h；Fe3O4@MPS、AIBN、VEC和1,4二氧六环的用量比例为70mg～100mg:5mg～7mg:230μL～300μL:8mL～12mL；2将5’-磷酸二酯酶Phosphodiesterase，PDE与步骤1制备得到的Fe3O4@MPS@pVEC在缓冲溶液中混合反应12h～24h，得到所述的磁性酶反应器；所述缓冲溶液为pH5.0～6.5，浓度为1120molL～130molL的含K+和Na+缓冲液；优选为Na2HPO4-KH2PO4缓冲溶液pH6.2；Fe3O4@MPS@pVEC与5'-磷酸二酯酶的用量比例为3mg～10mg:450μg～1500μg。

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