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用于减少信号生成数字测定中的噪声的方法 

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申请/专利权人:雅培日本有限责任公司

摘要:公开了使用着色剂降低信号生成数字测定诸如荧光数字免疫测定中的背景噪声的方法。所述方法利用特异性结合生物样品中的分析物的结合成员。所述结合成员与信号生成化合物例如酶缀合,所述信号生成化合物与结合成员解离。着色剂与信号生成底物例如酶的荧光或生色底物一起添加,或在信号生成底物之后添加,以降低荧光数字免疫测定中的背景噪声。检测在信号生成化合物和信号生成底物之间生成的信号,并将其与分析物的存在和或浓度关联。

主权项:1.用于确定流体样品中的分析物的单分子的存在或不存在的信号生成数字测定方法,所述方法包括:a使含有或怀疑含有分析物的流体样品与多个固体支持物接触以产生混合物,其中每个固体支持物包含一个或多个能够结合分析物的第一特异性结合成员,由此产生固体支持物-第一特异性结合成员-分析物复合物;b用第一洗涤缓冲液洗涤混合物中的固体支持物-第一特异性结合成员-分析物复合物,以除去未与分析物结合的任何固体支持物-第一特异性结合成员,由此产生洗涤的混合物;c向洗涤的混合物中添加一个或多个能够结合分析物的第二特异性结合成员,由此产生固体支持物-第一特异性结合成员-分析物-第二特异性结合成员复合物,其中所述第二特异性结合成员包含与之附接的信号生成化合物;d用第二洗涤缓冲液洗涤固体支持物-第一特异性结合成员-分析物-第二特异性结合成员复合物,以除去未与结合所述第一特异性结合成员的分析物结合的任何第二特异性结合成员,由此产生洗涤的固体支持物复合物;e向洗涤的固体支持物复合物中添加信号生成底物和着色剂,其中所述信号生成化合物和所述信号生成底物产生可检测信号;f将洗涤的固体支持物复合物的至少一部分空间分离至多个分开位置中,其中多个分开位置包含多个反应容器,且其中洗涤的固体支持物复合物存在于水相中;g用密封剂覆盖多个反应容器,其中水相被反应室中的密封剂置换;和h使用数字计数装置检测可检测信号的存在或不存在,其中所述可检测信号的存在的检测表明样品中的分析物的单分子的存在。

全文数据:

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