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人源化IV型胶原蛋白、表达载体、制备方法及应用 

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申请/专利权人:陕西慧康生物科技有限责任公司

摘要:本发明公开了人源化IV型胶原蛋白,还公开了该胶原蛋白的表达载体、制备方法及应用。胶原蛋白制备方法:S1优选天然人源化IV型胶原蛋白核苷酸序列,经毕赤酵母密码子优化及设计,获得aat串联核苷酸序列;S2对载体和aat串联核苷酸序列双酶切,连接转化大肠杆菌感受态,获得质粒;S3对质粒转化毕赤酵母并筛选得到工程菌;S4将工程菌发酵放大得到上清液;S5对上清液进行蛋白纯化,得人源化IV型胶原蛋白。本发明提供的人源化IV型胶原蛋白及制备方法,解决了现有组成型表达体系启动效率低、诱导型表达体系表达过程中引入有害试剂易造成残留的问题。

主权项:1.人源化IV型胶原蛋白,其特征在于,所述人源化IV型胶原蛋白氨基酸序列如SEQIDNo.1所示,所述人源化IV型胶原蛋白核苷酸序列如SEQIDNo.2所示,所述人源化IV型胶原蛋白氨基酸序列选自全长人源化IV型胶原蛋白a1链上的258-266aas,275-301aas,317-331aas,341-361aas,595-606aas,615-640aas,839-848aas,912-928aas,947-956aas,963-995aas,1041-1055aas,1076-1086aas,1138-1168aas,1180-1188aas,1213-1244aas,从N端至C端依次拼接获得278个氨基酸的组合肽链。

全文数据:

权利要求:

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