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一种构建含细胞自分泌ECM细胞肉的方法 

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申请/专利权人:陕西未来肉膳健康科技有限公司

摘要:本发明涉及细胞培养及应用技术领域,具体公开了一种构建含细胞自分泌ECM细胞肉的方法,CEF细胞接种于1号培养基中于110‑120rpm转速增殖培养;当培养至细胞密度达到1.4E6‑1.5E6时,更换为2号培养基,调整为变速培养:40‑45rpm,5‑6min;0rpm,1‑1.2h,24次循环,变速培养20‑24h后获得100‑200um的悬浮细胞聚合体;然后将转速调整为55‑60rpm恒速培养,每天更换一次2号培养基,培养4‑6天,收获450‑500um的自分泌ECM细胞肉。本发明能获得450‑500um的自分泌ECM细胞肉,细胞活率在90%以上,且能够自分泌ECM。

主权项:1.一种构建含细胞自分泌ECM细胞肉的方法,其特征在于,包括如下步骤:细胞增殖培养:CEF细胞接种于1号培养基中于110-120rpm、38-39℃、5%CO2条件下培养4-6天,每2-3天更换一次1号培养基;1号培养基:DMEM+10%FBS+25ugml抗细胞结团剂+1%F68;悬浮细胞聚合体制备:当培养至细胞密度达到1.4E6-1.5E6时,更换为2号培养基,调整为变速培养:40-45rpm,5-6min;0rpm,1-1.2h,24次循环,变速培养20-24h后获得100-200um的悬浮细胞聚合体;2号培养基:DMEM+10%FBS+1%F68;自分泌ECM细胞肉制备:然后将转速调整为55-60rpm恒速培养,每天更换一次2号培养基,培养4-6天,收获450-500um的自分泌ECM细胞肉。

全文数据:

权利要求:

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