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申请/专利权人:新疆生产建设兵团医院
摘要:本发明涉及肺炎支原体大环内酯类耐药突变位点的检测技术领域,是一种基于分子信标技术检测肺炎支原体高频耐药突变位点RT‑PCR的方法,包括引物与探针的选择和设计,引物与探针的合成和验证,RT‑PCR体系构建和检测性能评估。本发明针对肺炎支原体A2063G、A2064G两个临近突变位点和野生型序列设计三个分子信标,实现在一个RT‑PCR体系中使用一对引物三个探针进行肺炎支原体大环内酯类抗菌药物高水平耐药检测的目的,实现了常规实验室里既能检测肺炎支原体,也能鉴定大环内酯类高水平耐药突变位点的目标。
主权项:1.一种基于分子信标技术检测肺炎支原体高频耐药突变位点RT-PCR的方法,其特征在于包括下述步骤:S1,引物与探针的选择和设计,包括:目的片段选择、引物与探针设计;S2,引物与探针的合成和验证,包括:目的片段合成、探针性能实验;S3,RT-PCR体系构建和检测性能评估,包括:各阳性质粒梯度稀释、检测RT-PCR反应体系检出限与线性、RT-PCR反应体系检测特异性验证、确定检出限。
全文数据:
权利要求:
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