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申请/专利权人：四平华科生物技术有限责任公司
摘要：本发明提供了一种二次修饰的SOD及其制备方法和在治疗骨关节炎、类风湿关节炎产品中的应用，属于酶修饰技术领域。本发明将SOD与缓冲液混合后依次加入还原剂和活化后的mPEG‑ALD进行第一次修饰，修饰结束后加入保护液在1‑5℃下保存得第一修饰液；取第一修饰液边搅拌边滴入活化后的右旋糖苷进行第二次修饰得第二修饰液；将第二修饰液通过凝胶过滤层析获得二次修饰SOD，通过二次修饰结合两种修饰物各自的优点SOD使其半衰期显著增加、具有较高的稳定性，耐高温效果好，再次加工对活性影响较小、加工后的保存更稳定，对骨关节炎或类风湿性关节炎有较好的治疗效果。
主权项：1.一种二次修饰SOD的方法，其特征在于，包括以下步骤：1将SOD与缓冲液混合后依次加入还原剂和活化后的mPEG-ALD进行第一次修饰，修饰结束后加入保护液在1-5℃下保存得第一修饰液；2取第一修饰液边搅拌边滴入活化后的右旋糖苷进行第二次修饰得第二修饰液；3将第二修饰液通过凝胶过滤层析获得二次修饰SOD；所述mPEG-ALD的分子量为1500-1800；所述右旋糖苷的分子量为5000-6000；活化mPEG-ALD的方法为：将分子量1500-1800的mPEG-ALD与三聚氯氰按摩尔比1:1于二氯甲烷中在40℃下进行活化，活化结束后进行分离纯化得到活化mPEG-ALD；活化右旋糖苷的方法为：将分子量为5000-6000的右旋糖苷水浴溶解，在4℃下滴入12％的高碘酸钠溶液，避光条件下搅拌30min，避光低温保存过夜；以5％的亚硫酸氢钠溶液滴定未反应的高碘酸钠然后用蒸馏水透析得到氧化度15-20％的活化右旋糖苷；所述步骤1中SOD、还原剂、mPEG-ALD、保护液的摩尔比为1：0.5-1.5：0.5-3：1-2.5；所述还原剂为NaCNBH3、NaBH4或NaBHOAc3中的任意一种；所述保护液为亚麻酸、乙二醇或丙二醇中的任意一种。
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百度查询： 四平华科生物技术有限责任公司 一种二次修饰的SOD及其制备方法和在治疗骨关节炎、类风湿关节炎产品中的应用
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