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申请/专利权人：中国科学院水生生物研究所
摘要：本发明公开了一种斑马鱼无创检测水体污染物雌激素活性的方法，属于生态毒理学技术领域，包括以下步骤：S1、雄性斑马鱼置于17α‑乙炔基雌二醇EE2标准暴露液中养殖后收取皮肤粘液样品测定卵黄蛋白原VTG浓度；S2、拟合EE2暴露浓度‑VTG相对浓度标准曲线；S3、雄性斑马鱼置于测试水样中养殖后收取粘液样品测定VTG浓度；S4、根据标准曲线计算待检测水体的EE2当量。本发明为水体雌激素活性的检测提供了一种新的手段，操作步骤简单，不涉及动物解剖，只需采集鱼类皮肤粘液、检测VTG即可快速预警水体雌激素类似物污染，与现有检测方法相比具有高效、准确、低成本的优点，并且可有效保护动物福利。
主权项：1.一种斑马鱼无创检测水体污染物雌激素活性的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、以17α-乙炔基雌二醇EE2为模式雌激素污染物，将EE2从0ngL开始按阶梯浓度配制标准暴露液，将雄性斑马鱼置于各浓度的标准暴露液中稳定养殖7天，养殖过程中每天更换新的同浓度标准暴露液，养殖结束后各EE2浓度下养殖的雄性斑马鱼均无创采集皮肤表面粘液并制成粘液样本，利用ELISA试剂盒测定粘液样品的VTG浓度；S2、以步骤S1中暴露液EE2浓度0ngL下的粘液样品作为对照组，将步骤S1中各粘液样品的VTG浓度除以对照组VTG浓度换算为相对浓度，再将EE2暴露浓度与VTG相对浓度进行拟合，得到EE2暴露浓度-VTG相对浓度标准曲线I；S3、以曝气自来水作为对照水样，将雄性斑马鱼分别置于测试水样以及对照水样中，按步骤S1中同样的养殖条件和养殖时间进行稳定养殖，暴露过程中每天更换新的相同水样，养殖结束后无创采集雄性斑马鱼粘液并制成粘液样本，利用ELISA试剂盒测定粘液样本的VTG浓度；S4、将步骤S3中测试水样中粘液样本的VTG浓度除以对照水样中粘液样本的VTG浓度，得到测试水样的VTG相对浓度，代入步骤S2所得的EE2暴露浓度-VTG浓度标准曲线I，得到待检测水体的EE2浓度当量。
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