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申请/专利权人：华中农业大学
摘要：本发明公开了一种体外培养鸡小黄卵泡的方法。涉及家禽卵泡体外培养技术领域。包括将筛选后的小黄卵泡转移到PET细胞培养小室上层，并加入预热好的生长培养基，得培养物；将培养物转移到38.5℃，5％CO2的环境下培养。本发明采用PET细胞小室进行体外卵泡培养，进一步模拟体内环境在体外给予卵泡支撑功能；卵泡在38.5℃，5％CO2的培养箱中培养更接近于鸡体内的温度，模拟真实情况；在DMEM培养基中添加活性VD3，调控体外培养系统类固醇的代谢，促进卵泡的增殖和存活。
主权项：1.一种体外培养鸡小黄卵泡的方法，其特征在于，包括以下步骤：1将筛选后的小黄卵泡转移到PET细胞培养小室上层，并加入预热的生长培养基，得培养物；2将培养物转移到38.5℃，5％CO2的环境下培养；步骤1所述筛选的标准：结构完整表面无血污，直径6～8mm；所述PET细胞培养小室：24孔0.45μm，每个孔放1枚小黄卵泡；所述预热：37℃水浴锅进行预热40min，所述生长培养基的加入量：每孔1mL；所述PET细胞小室各孔间隙加入湿度平衡液，所述湿度平衡液：20μL灭菌的PBS；所述生长培养基：含有1％青霉素-链霉素溶液，1％ITS液体培养基补充剂，5％胎牛血清FBS和1000nM活性VD3的DMEM培养基；步骤2所述培养的时间：72h；步骤2每24小时更换一次生长培养基，更换时，收集替换下的生长培养基用于雌激素和孕激素含量的测定。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 华中农业大学 一种体外培养鸡小黄卵泡的方法
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