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一种香紫苏子叶和下胚轴离体再生及遗传转化体系的建立方法 

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摘要:本发明公开了一种香紫苏子叶和下胚轴离体再生及遗传转化体系的建立方法,所述方法包括如下步骤:1.香紫苏种子的消毒及无菌外植体的获得;2.香紫苏子叶及下胚轴为外植体的诱导培养,诱导培养包括:芽的诱导培养和根的诱导培养;3.在建立香紫苏子叶及下胚轴离体再生的基础上,探究了香紫苏遗传转化体系的最佳条件;4:待转化出香紫苏苗,提取香紫苏苗基因组DNA,进行PCR阳性检测;5.阳性转基因苗的练苗和移栽。采用本发明的方法,成功实现了香紫苏子叶及下胚轴离体再生及遗传转化体系的建立。本发明的方法解决了香紫苏难分化和难生根的问题,重复性及稳定性好,为利用基因工程技术开展香紫苏品种改良奠定了一定的基础。

主权项:1.一种香紫苏子叶和下胚轴离体再生的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)香紫苏种子的灭菌及播种于种子萌发培养基中,得到子叶和下胚轴外植体;所述的种子萌发培养基以12MS为基础培养基,还包括以下含量组分:15-20gL蔗糖、8-9gL琼脂条和1-2mgLGA3,pH值为5.8-6.0;(2)以香紫苏子叶及下胚轴为外植体进行诱导培养,诱导培养包括:芽的诱导培养和根的诱导培养;所述的芽的诱导培养基以MS为基础培养基,还包括以下含量组分:30gL蔗糖、9gL琼脂条、1.5-3mgL6-BA和0.2-0.4mgLIAA,pH值为5.8-6.0;所述的根的诱导培养基以12MS为基础培养基,还包括以下含量组分:15gL蔗糖、9gL琼脂条、0.125-1.5mgLNAA、0.1-0.5mgLIAA、0.1-0.5mgLIBA,pH值为5.8-6.0。

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