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摘要:本发明公开了一种改进原位邻位连接技术检测效率的方法,包括如下步骤:1将第一一抗以及第二一抗共同处理待测样品;2将第一二抗和第二二抗分别与第一寡核苷酸和第二寡核苷酸偶联,构建形成第一偶联物和第二偶联物;3将上述第一偶联物和第二偶联物共同处理待测样品;4先加入一夹板探针进行处理,再加入成环探针进行处理以获得环状模板,接着基于该环状模板进行滚环扩增以获得滚环扩增产物;然后加入检测探针进行处理,以识别滚环扩增产物,进而通过检测设备进行检测以确定上述第一蛋白和第二蛋白的互作情况。本发明实现了对细胞和组织中蛋白质相互作用的定量和定位检测,提升了蛋白质相互作用检测的灵敏度和效率。
主权项:1.一种改进原位邻位连接技术检测效率的方法,其特征在于:包括如下步骤:1将对应第一蛋白的第一一抗以及对应第二蛋白的第二一抗共同处理待测样品中的细胞,该细胞中含有第一蛋白和第二蛋白;2将对应第一一抗的第一二抗和对应第二一抗的第二二抗分别与第一寡核苷酸和第二寡核苷酸偶联,构建形成第一偶联物和第二偶联物;3将上述第一偶联物和第二偶联物共同处理经第一一抗和第二一抗共同处理过的待测样品;4在步骤3处理后的待测样品中先加入一夹板探针进行处理以使上述第一寡核苷酸和第二寡核苷酸彼此靠近,该夹板探针分别与上述第一寡核苷酸和第二寡核苷酸的序列的一部分互补配对;再加入成环探针进行处理以获得环状模板,该成环探针与上述第一寡核苷酸和第二寡核苷酸的序列的另一部分互补配对;接着基于该环状模板进行滚环扩增以获得滚环扩增产物;然后加入检测探针进行处理,以识别滚环扩增产物,进而通过检测设备进行检测以确定上述第一蛋白和第二蛋白的互作情况。
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百度查询: 华侨大学 一种改进原位邻位连接技术检测效率的方法
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