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摘要:本发明公开了一种基于AuCdSCdIn2S4的光电化学适配体传感器检测沙门氏菌的方法,将CdSCdIn2S4粉体超声溶于水中,煅烧后冷却,AuNPs溶液滴于修饰CdSCdIn2S4的FTO上得AuCdSCdIn2S4FTO电极,将活化致病菌适配体滴在CdSCdIn2S4AuFTO电极上孵育,将适配体互补链与辣根过氧化物复合滴在电极上孵育,用Tris‑HCl溶液冲洗后得工作电极;将工作电极、饱和甘汞电极和铂对电极组成三电极体系,外接电化学工作站,和模拟日光氙灯光源系统,得到光电化学适配体传感器进行沙门氏菌检测,本发明光电流响应能力强,检测灵敏度高,检测时间短,成本低廉。
主权项:1.一种基于AuCdSCdIn2S4的光电化学适配体传感器检测沙门氏菌的方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤1、制备CdSCdIn2S4纳米粒子;a.在50mL乙二醇中制备四水合硝酸镉(CdNO32·4H2O)和硫代乙酰胺的前驱体溶液,并以1:1的摩尔比例混合,然后使用磁力搅拌器剧烈搅拌40分钟;将获得的均相溶液转移到100mL反应釜中,保持在160℃反应12小时,自然冷却至室温;通过离心收集产物,用去离子水和乙醇洗涤2次以除去残留的有机溶剂和无机盐,然后在70℃下在空气中干燥8小时,研磨后得到CdS粉体;b.在70mL乙二醇中制备CdNO32·4H2O,InCl3.4H2O和硫代乙酰胺的前驱体溶液,并以1:2:4的摩尔比例混合,然后加入步骤1a制备的CdS粉末,使用磁力搅拌器剧烈搅拌40分钟;将获得的均相溶液转移到100mL反应釜中,保持在160℃反应12小时,然后自然冷却至室温;通过离心收集产物,用去离子水和乙醇洗涤2次以除去残留的有机溶剂和无机盐,然后在70℃下在空气中干燥8小时,研磨后置于300℃的马弗炉中煅烧2h,随炉自然冷却至室温后再次研磨所得到的产物为CdSCdIn2S4粉体;CdS纳米颗粒复合在CdIn2S4纳米片上,CdS与CdIn2S4配比为1:1;步骤2、制备纳米金溶液将98mL去离子水加入双颈烧瓶中,再加入2mL浓度为50mmolL的HAuCl4溶液使最终HAuCl4溶液的浓度为1mmolL;将冷凝器、玻璃塞分别连接到双颈烧瓶的两个颈上,在120℃的油浴锅中边搅拌边回流;当溶液开始回流时,取下玻璃塞迅速加入10mL浓度为38.8mmolL的柠檬酸钠溶液,使溶液颜色在1min内由浅黄色变为酒红色,随后继续回流20min,最后关闭加热源使其在搅拌中冷却至室温,存放4℃冰箱中以备待用;步骤3、制备辣根过氧化物酶(HRP)-cDNA复合物取5μL100μmolL的cDNA,然后将其加入到1mL的5mmolLPBS缓冲液;继续往该PBS中加入50μL1mgmL的HRP,孵育1h,于12000rpm离心分离,去除未结合的HRP,用5mmolLPBS清洗沉淀,并将清洗过的沉淀重新分散在含有0.1%牛血清白蛋白(BSA)的5mmolLPBS中,4°C保存,备用;步骤4、构建传感器工作电极a.称取步骤1b制备的CdSCdIn2S4样品,加入2mL去离子水配置成浓度为20~40mgmL的CdSCdIn2S4溶液,常温下磁力搅拌30min,在40℃条件下超声溶解30min,之后在研钵中研磨30min使CdSCdIn2S4粉体形成均匀的悬浮液,无细小颗粒感;取25μL均匀悬浮液滴涂于FTO电极上,在常温无风处自然干燥,然后300℃条件下煅烧2h,煅烧完毕后样品随炉自然冷却,得到CdSCdIn2S4FTO电极;b.将20μL制备好的纳米Au溶液滴涂到CdSCdIn2S4FTO电极表面,然后用玻璃棒涂匀,干燥后得到AuCdSCdIn2S4FTO电极;随后将20μL浓度为1~5μmolL的沙门氏菌适配体溶液滴涂到得到的AuCdSCdIn2S4FTO电极表面,在4℃下孵化过夜;适配体与AuNPs通过Au-S键的强相互作用力牢牢固定在了AuNPs的表面,用Tris-HCl缓冲液冲洗电极表面去除未被固定的适配体分子,得到AptamerAuCdSCdIn2S4FTO电极;之后取20μL步骤3制备的HRP-cDNA复合物溶液滴涂到AptamerAuCdSCdIn2S4FTO电极表面,在4℃下孵化过夜;HRP-cDNA复合物与AuNPs通过Au-S键的强相互作用力牢牢固定在了AuNPs的表面,用Tris-HCl缓冲液冲洗电极表面,去除未被固定的适配体分子,得到HRP-cDNAAptamerAuCdSCdIn2S4FTO电极;步骤5、构建光电化学适配体传感器用于沙门氏菌的检测将步骤4b制备的HRP-cDNAAptamerAuCdSCdIn2S4FTO电极作为工作电极,铂丝电极为对电极,饱和甘汞电极为辅助电极,分别置于PBS溶液中构建三电极体系,抗坏血酸作为电子供体,氙灯作为光源,构建基于AuCdSCdIn2S4的光电化学适配体传感器,用于沙门氏菌的检测。
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百度查询: 大连工业大学 一种基于Au/CdS/CdIn2S4的光电化学适配体传感器检测沙门氏菌的方法
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